EGFR蛋白在人胃癌组织中的表达及其临床价值的论文.docVIP

　　EGFR蛋白在人胃癌组织中的表达及其临床价值的论文 【摘要】 目的 研究表皮生长因子受体蛋白（egfr）在胃癌中的表达及其与各临床病理特征之间的关系，回顾性分析egfr蛋白表达与胃癌患者生存期的关系，探讨其成为胃癌预后指标和分子靶向治疗靶点的可行性。方法 应用免疫组织化学方法检测具有随访资料的103例胃癌标本中egfr蛋白的表达，并将检测结果与临床病理特征进行综合分析。结果 ①103例胃癌组织中egfr蛋白的阳性表达率为42.7%(44/103)，在胃正常组织中无表达；②egfr蛋白表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度均无相关性（ｐgt;0.05），而与肿瘤的浸润深度、病理分期、淋巴结转移、远处转移相关(ｐlt;0.05)；③egfr蛋白表达阳性患者中位生存时间为11.0个月，表达阴性患者中位生存时间为65.2个月，阳性表达患者与阴性表达患者生存时间差异有统计学意义（ｐlt;0.05）。结论 ①egfr与胃癌的浸润、转移及预后密切相关，可作为判断胃癌生物学行为和预后的重要参考指标；②egfr在胃癌组织中的阳性表达率较高，为imcc225、zd1839、osi774等分子靶向治疗药物在胃癌的应用提供了理论依据。【关键词】 胃癌 egfr 预后 分子靶向治疗 在肿瘤基因水平上寻找新的预后指标并开展靶向治疗已成为目前肿瘤研究的热点之一。近年来随着对肿瘤生物学研究的不断深入，新的分子靶向治疗药物也不断出现。本研究应用免疫组化的方法检测并分析表皮生长因子受体（epidemal groab0196 monoclonal antibody antihuman egfr（克隆号egfr/113，批3）。试剂盒选用即用型免疫组化(ihc)二步法elivisiontm 广谱染色试剂盒。 1.2.2 仪器 石蜡切片机(shandon as325)；显微镜(olympus bx40)；电热恒温干燥箱(56℃～65℃，上海跃进医疗器械一厂，标准号:zby14983，型号:gzxdh50×55)；微波炉（二步法），具体操作步骤如下：（1） 65℃烤片2～4h；（2） 石蜡切片脱蜡至水；（3） 蒸馏水冲洗2min；⑷抗原修复：本实验用法为浸泡于枸橼酸盐缓冲液（ph 6.0）中，在功率850in，放至室温后用蒸馏水冲洗2min；（５）浸泡于3％ h2o2中，在功率350in 30s，以消除内源性过氧化物酶的活性；（６）蒸馏水冲洗2min；（７）pbs冲洗，2min×3次；（８）滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液，37℃孵育1h；（９）pbs冲洗，2min×3次；（１０）滴加试剂1（polymer helper），37℃孵育20min；（１１）pbs冲洗，2min×3次；（１２）滴加试剂2（poly peroxidaseantimouse/rabbit igg），37℃孵育30min；（１３）pbs冲洗，2min×3次；（１４）dab显色5min；（１５）自来水充分冲洗，复染；（１６）脱水，透明，封片。 1.4 结果判断 每批实验设阳性和阴性对照。egfr阴性：细胞膜无棕黄色颗粒样沉淀；阳性：细胞膜有棕黄色颗粒样沉淀。染色分级：整张切片无一个阳性细胞（－）；阳性细胞数lt;10%（＋）；阳性细胞数10%～50%（＋＋），阳性细胞数gt;50% (＋＋＋)。 1.5 统计学方法 采用χ2 检验和fishers精确概率法，生存期分析采用lifetables法，生存期曲线显著性的比较用cc225（cetuximab）是目前临床上最为先进的抗egfr人鼠嵌合单克隆抗体，抗肿瘤细胞增殖机制为抑制egfr表达阳性的癌细胞cdk2的活性，并伴有cyclina、cycline相关的组蛋白h1激酶活性的明显下降，同时上调细胞周期抑制剂p27kip1的mrna表达，形成p27kip1cdk2复合体抑制剂，诱导细胞在g1期停滞，从而抑制癌细胞的增殖。imcc225与放化疗联合应用时，许多预后较差的晚期肿瘤取得了完全缓解。目前有关imcc225治疗晚期胃癌的临床实验正在进行中[49]。 egfr在胃癌的浸润、促进淋巴结转移及远处转移的过程中起着非常重要的作用。本研究结果表明egfr在胃癌中有较高的阳性表达率，为imcc225、zd1839、osi774等分子靶向药物在胃癌综合治疗中的运用提供了理论依据。 【