研究生基本实验技能讲训.pptVIP

研究生科研实验教学基地建设基本实验技能培训;;1.DNA的提取 DNA提取原理 DNA提取方法 操作注意事项;1.1 基因组DNA提取原理;仪器准备： 台式离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、移液器、离心管（灭菌）、吸头（灭菌）、镊子（灭菌）、离心管架 试剂准备： 试剂盒、无水乙醇等;试剂盒;试剂盒内容;操作步骤（重点）;操作步骤（重点）;计算公式： OD260/OD280=1.7-1.9 DNA浓度(ug/ul)=OD260×50×稀释倍数/1000 OD260=0.1 稀释倍数=250 DNA浓度=0.1×50 ×250/1000=1.25 ug/ul;操作注意事项;2.PCR PCR体系和循环条件 PCR操作步骤 操作注意事项;仪器准备： PCR仪，微型离心机、移液器、离心管（灭菌）、吸头（灭菌）、镊子（灭菌）、离心管架 试剂准备： ddH2O, PCR Buffer，dNTP，引物，PCR聚合酶，DNA模板;2.1 PCR体系和循环条件（重点）;60 ℃， 30s;2.2 PCR操作步骤（重点）;2.3 PCR操作注意事项;3.琼脂糖凝胶电泳 凝胶电泳原理 电泳方法步骤 操作注意事项;3.1 琼脂糖凝胶电泳原理;配置1%的胶：称1g琼脂糖于适当大小三角瓶中，倒入100ml的1*TAE，微波炉加热至完全融化； 待凝胶温度降至50-60度