分子印迹技术在中药提取分离中的应用的论文.docVIP

　　分子印迹技术在中药提取分离中的应用的论文 【关键词】 分子印迹技术；中药；提取分离；综述 分子印迹技术(molecular imprinting technology,mit)是20世纪末出现的一种高选择性分离技术,这种技术的基本思想是源于人们对抗体-抗原专一性的认识,利用具有分子识别能力的聚合物材料——分子印迹聚合物(molecule imprinting polymer,mip)来分离、筛选、纯化化合物的一种仿生技术。因为制备的材料有着极高的选择性及卓越的分子识别性能,很快在固相萃取、人工酶学、手性拆分、生物传感器、不对称催化等方面得到了广泛的应用。笔者现主要对mit在中药提取分离中的应用作一概述。 　　1 分子印迹技术基本原理及聚合物的制备 　　1.1 基本原理 　　mit是选用能与印迹分子产生特定相互作用的功能性单体,通过共价或非共价作用在溶剂中形成印迹分子-功能单体复合物,加入交联剂,在引发剂的引发下与带有特殊官能团的功能单体进行光或热的聚合,形成三维交联的聚合物网络,然后,用合适的溶剂除去印迹分子,在聚合物网络中形成空间和化学功能与印迹分子相匹配的空穴。这种空穴与印迹分子结构完全一样,可对印迹分子或与之结构相似的分子实现特异性的识别。 　　1.2 分子印迹聚合物的制备 　　分子印迹聚合物的制备过程可分为3步：第一步是印迹,将印迹分子和功能单体按比例混合,使其存在一定的分子间作用力；第二步是聚合,加交联剂,使复合物通过聚合反应形成聚合物；第三步是去除印迹分子,反复洗脱水解,使其形成具有一定空穴的分子印迹聚合物。.根据功能单体和印迹分子间作用力的差异,mip可分为以下3类。 　　1.2.1 共价键法 　　也称预先组织法。印迹分子与功能单体通过可逆的共价键结合,加入交联剂共聚后,印迹分子通过化学方法从聚合物上断开,再用极性溶剂将印迹分子洗脱下来,使其形成具有高密度空腔的分子印迹聚合物。其主要的反应类型有形成硼酸酯、西佛碱、缩醛(酮)、酯等。共价键法的优点是空间位置固定,选择性高,峰展宽和脱尾少,常用于诸如糖类、氨基酸类、芳基酮类等多种化合物的特定性识别。由于共价键比较稳定,因而会生成较多的键合位点,印迹效率要高于非共价键印迹法。其缺点是功能单体选择有限,使模板限制较大且难以除去。因此,在选择模板时共价键键能必须适当，否则会使在识别过程中结合与解离速度偏慢,难以达到热力学平衡。 　　1.2.2 非共价键法 　　也称自组装法。印迹分子与功能单体通过氢键、金属配位键、偶极作用、离子化作用、疏水作用、静电引力、范德华力等多种非共价键作用力生成分子自组装体,在合适的引发条件下生成聚合物,将聚合物研磨为粉末并用合适的溶剂除去模板分子。这种过程是模拟生物中多重分子间作用而具有立体效应。其优点是可使用多种功能单体,模板分子多样且易于用适宜的溶剂洗脱。这种方法制得的mip因使用多种作用的结合,具有选择性高、分离能力强、识别速度快等特点。缺点是在聚合前,模板分子与单体可形成多种分子络合物,制备的mip结合位点不均匀,常导致非特异性结合。在洗脱过程中,由于很难将聚合物中的模板分子除去,就会造成“模板渗漏”。但由于该法灵活方便,制备过程简单,使得此法比共价键法更适用。 　　1.2.3 半共价印迹法 　　也称空间牺牲法。即聚合时功能单体和模板分子通过共价作用形成稳定的配合物,而在对印迹分子的识别过程中,仅通过非共价作用力来进行重新键合。这种方法由于模板分子和单体用共价键结合,使生成的聚合物结构完整,结合点均匀整齐。在洗脱过程中用强极性溶剂反复洗涤,从而解决了非共价健法的“模板渗漏”对待测物的影响。 　　2 在中药提取分离中的应用 　　由于含量低、结构复杂且类型多样,使中药活性成分分离困难。高效液相色谱法、硅胶柱色谱法等常规的分离方法溶剂消耗量大、效率低,且容易造成微量的有效成分丢失。mit与上述色谱分离技术相比,具有分子识别性强、固定相制备简便快速、操作简单、性质比较稳定(耐酸碱，耐高温、高压等)、溶剂消耗量小、模板和mips都可以回收再利用等优点,在中药有效成分的提取分离中有很好的应用前景。 　　2.1 活性成分的分离纯化 　　目前所报道的mit多用于黄酮类、多元酚类、生物碱类、甾体类和香豆素类的分离纯化。程氏等[1]以葛根素为模板分子、丙烯酰胺为单体、二甲基丙烯酸乙二醇酯(edma)为交联剂,制备葛根素mip用于分离葛根提取液中的葛根素,并用静态吸附实验研究了葛根素mip的吸附行为。结果表明,该mip对模板分子葛根素印迹效果较强,得葛根素回收率为83%,远大于用大孔吸附树脂的提取效果。谢氏等[2]用非共价键法,以丙烯酰胺作功能单体、以强极性化合物槲皮素为模板,将槲皮素mip用于银杏叶提取物水解液的分离,得槲皮素的回收率为89%,并用固相