升压宁对内毒素休克肝损伤大鼠肿瘤坏死因子.docVIP

　　升压宁对内毒素休克肝损伤大鼠肿瘤坏死因子 作者：郑秀丽，冯全生，杨宇 张琦，乔胃娟 【摘要】 目的观察升压宁对内毒素休克肝损伤大鼠肝组织中肿瘤坏死因子-α（tnf-α）和诱导型一氧化氮合酶（inos）的影响。方法采用一次性静脉注射内毒素（lps）10 mg/kg复制内毒素休克模型，以升压宁预处理动物，并以地塞米松为阳性对照，免疫组化法测定肝组织中tnf-α和inos的表达。结果内毒素休克模型组存在严重肝损伤，肝组织中tnf-α和inos表达较空白对照组显著增强（p﹤0.01），升压宁组肝损伤较模型组减轻，tnf-α和inos的表达与模型组比较显著降低（p﹤0.01）。结论升压宁能减轻内毒素休克肝损伤，其机理与抑制tnf-α和inos的表达有关。 【关键词】 升压宁； 内毒素休克； 肝损伤； 生脉散 　　abstract：objectiveto explore the effect of sheng ya ling on tnf-α and inos in liver injury rats ethodsthe rats g/kg to make endotoxic shock models. they ethasone as positive control group. then observed the expression of tnf-a and inos easured by immunohistochemical method.results in the endotoxic shock model group, livers of rats ore significantly than that in the blank control group(plt;0.01). the liver injury of sheng ya ling group odel group and expression of tnf-α and inos ore significantly than that of model group(plt;0.01). conclusionsheng ya ling can reduce liver injury by endotoxic and its mechanism may be aisan 升压宁为长期从事感染性疾病研究的全国名老中医张之文教授之经验方，该方具有较好的升压、抗感染作用。.cOm温病学家叶天士提出“温邪上受，首先犯肺”，故前期实验从肺损伤入手进行研究，前期结果表明，升压宁能减轻内毒素休克肺损伤，其机理与抑制tnf-α和inos的表达有关［1］。 现代研究认为，肝脏是机体清除内毒素的主要器官，是机体的主要“细胞因子产地和储库”［2］。因此，本实验采用内毒素所致感染性休克大鼠肝损伤模型，通过观察肝脏的组织形态学变化及测定肝组织中肿瘤坏死因子-α（tnf-α）和一氧化氮合酶（inos）的表达，探讨升压宁对内毒素休克肝损伤的保护作用机制。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物健康sd雄性大鼠46只，体质量220～250 g，由四川省中药研究所提供。 　　1.2 药物中药升压宁制成每毫升含1 g生药浓度，高温灭菌后4℃冰箱保存备用。阳性药地塞米松注射液，1 ml:5 mg/支，由西南药业股份有限公司生产。 　　1.3 试剂与仪器 　　内毒素（lps，o55:b5，sigma公司产品）；tnf-α试剂盒（北京莱博生物实验材料研究所）；inos试剂盒（美国santa cruz biotechnology公司产品）。多导生理记录仪（日本光电），bl-420e+生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司），电热恒温培养箱（北京中兴伟业仪器有限公司）。 　　2 方法 　　2.1 动物分组及处理 　　动物随机分为4组：空白对照组、休克模型组、升压宁组、阳性对照组。空白对照组10只，其余各组每组12只。处理如下：休克模型组（lps组），将lps经尾静脉按10 mg/kg一次性注入；升压宁组（lps+syn组），于造模前5天按成人等效剂量给予升压宁灌胃，10 g/kg，1次/d，连续5 d，并于造模（即注入lps）10 min后，再十二指肠给予升压宁1次；阳性对照组（lps+dsms组），于术前10 min尾静脉注入地塞米松（2 mg/kg）葡萄糖溶液5 ml/kg。空白对照组，在各相同时间点注入等量生理盐水。 　　2.2 动物模型制作 　　参照马超英［3］的造模方法，实验前打开bl-420e+生物机能实验系统。将sd大鼠用3％戊巴比妥钠溶液按0.15 ml/kg腹腔麻醉，仰卧固定于手术台，无菌操作下分离右侧颈总动脉，远心端用0号丝线结扎，近心端做一小切口插入肝素化硅胶管，0号丝线结