巴山冷杉中莽草酸的提取工艺及含量测定初步研究的论文.docVIP

　　巴山冷杉中莽草酸的提取工艺及含量测定初步研究的论文 作者：林於，马廉举，刘新，卓玉娟，张桂萍，姜展，郭虎，袁配 【摘要】 目的 制定巴山冷杉中莽草酸的提取工艺，并建立其含量测定方法。方法 采用水提-醇沉法对莽草酸进行提取,采用hplc法测定莽草酸的含量。结果 莽草酸在5～300 μg·ml-1范围内，质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 3)，平均回收率为94.5%，rsd=2.5%(n=5)。莽草酸收率为0.51%(纯度≥96%)。结论 本提取工艺简便易行;含量测定方法简便、准确、重复性好，可用于巴山冷杉中莽草酸的含量测定。 【关键词】 巴山冷杉;莽草酸;提取工艺;含量测定 　　(shool of chinese indigenous medicine,chongqing medical university,chongqing 400016,china)abstract:objective to establish methods for the determination and extraction of shikimic acid from abies fargesii franch.methods shikimic acid ployed to determine shikimic acid.results the linearity of shikimic acid l-1(r=0.999 3),and the average recovery ic acid ple and convenient.this method is convenient,rapid and accurate,and can be used for the determination of shikimic acid in abies fargesii franch. 　　key ic acid; extraction process;determination 　　目前莽草酸主要来源于木兰科八角茴香(fructus anisi stellati)，为抗禽流感与甲流感药物磷酸奥司他韦(oseltamivir phosphate)的重要前体[1]，故研究莽草酸的新资源具有重要的意义。.据报道松科杉属植物(圣诞树类)中含有莽草酸(shikimic acid)，并具有 工业 生产价值[2]。同属植物巴山冷杉(abies fargesii franch)是我国独有物种，分布在海拔1500～3000 m的以秦巴山地为中心的大巴山、秦岭与神农架等地山区[3]。巴山冷杉中是否含有莽草酸及其提取分离、含量测定方法等研究尚未见报道。 　 　1 材料与仪器 　　lc/ms 2010a液质联用仪(岛津，电喷雾离子化接口单级四极杆质谱检测器，esi离子源);agilent1100高效液相色谱仪(美国)，vdettler toledo ag135);uv2501pc(岛津);pe红外分光光度仪(美国);lxj11b离心机(上海精密仪器仪表有限公司)。 　　巴山冷杉，采自巫山县小山峡，经重庆医科大学生药室王刚副教授鉴定为松科植物巴山冷杉(abies fargesii franch)。取其嫩茎及叶于90 ℃干燥，粗碎，备用;莽草酸对照品(批号西安飞达生物技术有限公司，质量分数98%);水为重蒸水或去离子水;甲醇为色谱纯，其余试剂分析纯。 　 　2 方法与结果 　　2.1 巴山冷杉叶中莽草酸的鉴定 　　 参考 文献 [4]从松科马尾松中获得莽草酸的方法，取冷杉叶粗粉2 kg，8倍量水煎煮2次，滤过，合并滤液，减压浓缩至样品∶溶液≈1∶1，静置24 h，离心(5 000 r·min-1)，取上清液，用乙酸乙酯1 500 ml分次萃取，水相用水饱和的正丁醇1 500 ml分次萃取，合并正丁醇部分，减压浓缩使成稠膏，加适量甲醇微热使溶，进行柱层析(硅胶)，薄层色谱追踪检测，以石油醚乙酸乙酯(体积比4∶1)洗脱，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，回收甲醇，用甲醇丙酮(体积比4∶1)反复重结晶，得白色晶体0.8 g，作为样品。mp 187～188 ℃。ir (kbr)cm-1： 3 482， 　　2 953～2 523， 1 682， 1 648， 1 455， 1 292， 1 277， 　　1 092，1 072，931，863，739，样品的波谱、质谱数据均与莽草酸对照品相一致，见图1～3。广东药学院学报 第26卷 第4期 林於，等.巴山冷杉中莽草酸的提取工艺及含量测定初步研究 　　2.2 巴山冷杉叶中莽草酸的提取、分离工艺研究 　　2.2.1 提取次数的考察 取巴山冷杉叶粗粉(莽草酸含