肿瘤侵袭转移实验技术.ppt

肿瘤侵袭、转移实验技术; 目录;一、概述;二、细胞划痕实验;实验优点： 1.在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。 2.适合研究细胞与胞外基质（ECM）、细胞与细胞之间相互作用引起的细胞迁移。 3.与包括活细胞成像在内的显微镜系统兼容，可用于分析细胞间的相互作用。 4.研究细胞迁移的体外实验中最简单的方法。;实验材料： 细胞样品 仪器、耗材：6孔板 marker笔 直尺 枪头 试剂、试剂盒：无血清培养基、PBS;; 4.每孔加入5X105个细胞并培养约24h 注：1.数量以过夜贴壁能铺满为宜，适当调整 2.数量少时可培养一段时间至铺满板底 ; 5.用1ml枪头垂直于孔板和线制造细胞划痕，尽量保证各个划痕宽度一致 注：.人工枪头制造划痕难以保证划痕宽度的一致性，影响实验结果，这也是该方法最大的缺陷 ;6.吸掉旧培养基，用无菌PBS冲洗细胞3次，去除划下的细胞后???再加入无血清培养基，根据需要设加实验组、对照组。 注：冲洗时温柔，贴壁加入，避免冲掉单层细胞;7.放入37度5%CO2培养箱，培养。按0，（6），12，24小时取样，拍照。;新：德国IBIDI（易必迪）技术;谈几点问题： 1.细胞的选择：一般适用于上皮，纤维样细胞系 a.本身有迁移能力，且较强。 b.有极性，方便测量，观察。 c.对无血清有较强的忍受力。 ;三、Transwell;三、Transwell;三、Transwell;三、Transwell;三、Transwell;三、细胞划痕实验;三、Transwell;三、Transwell;四、裸鼠尾巴静脉注射;四、裸鼠尾巴静脉注射;四、裸鼠尾巴静脉注射;四、裸鼠尾巴静脉注射;四、裸鼠尾巴静脉注射;;谢谢！