雷公藤PTEN+基因全长克隆及表达分析.pdfVIP

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 48 卷 第 7 期 2017 年 4 月 ? 1391 ? ? 药材与资源 ? 雷公藤 PTEN 基因全长克隆及表达分析 周家伟 1，刘雨佳 1，胡添源 1，高 伟 1, 2*，黄璐琦 3 1. 首都医科大学中医药学院，北京 100069 2. 首都医科大学 中医络病研究北京市重点实验室，北京 100069 3. 中国中医科学院 中药资源中心，北京 100700 摘 要：目的 获得雷公藤 Tripterygium wilfordii 磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇 3-磷酸酶（Phosphatidylinositol-3,4,5- trisphosphate 3-phosphatase，PTEN）基因的 cDNA 全长，并预测其生物学功能。方法 根据雷公藤转录组数据设计引物，对雷 公藤 PTEN（TwPTEN）基因进行全长克隆；通过生物信息学方法对得到的 TwPTEN 基因进行分析，主要包括多重序列比对，蛋 白结构预测和构建进化树分析等。结果 根据分析结果 TwPTEN 基因全长为 2 247 bp，共编码 614 个氨基酸，等电点为 5.84，相 对分子质量为 66 900，多重序列比对显示其与其他植物的 PTEN 基因具有较高的同源性。雷公藤悬浮细胞经外源茉莉酸甲酯 （MeJA）诱导后，实时荧光定量结果显示，TwPTEN 的表达量明显增加，并在 12 h 达到最高，提示 PTEN 基因与植物的次生代谢 产物的产生有关。结论 本研究首次从雷公藤悬浮细胞中克隆得到 PTEN 基因，为进一步研究 TwPTEN 基因的功能奠定基础。 关键词：雷公藤；磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸肌醇 3-磷酸酶；克隆；生物信息学分析；表达分析 中图分类号：R282.12 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2017)07 - 1391 - 06 DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2017.07.022 Cloning and mRNA expression analysis of phosphatidylinositol-3,4,5- trisphosphate 3-phosphatase gene from Tripterygium wilfordii ZHOU Jia-wei1, LIU Yu-jia1, HU Tian-yuan1, GAO Wei1, 2, HUANG Lu-qi3 1. School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University, Beijing 100069, China 2. Beijing Key Lab of TCM