栀子的化学成分及抗白血病活性研究的论文.docVIP

　　栀子的化学成分及抗白血病活性研究的论文 作者：任强，孙丽华，刘新民，刘春雨，权丽辉，谢忱，廖永红 【摘要】 　　目的 阐明栀子gardenia jasminoides ellis中抗急性淋巴细胞白血病的活性成分。方法 用色谱方法分离栀子中化学成分，用波谱技术(ir，esims，1hnmr，13cnmr)进行结构鉴定，用四唑盐(mtt)比色法测定化合物对白血病细胞（hl60人早幼粒细胞白血病、reh人急性淋巴细胞白血病、 raji淋巴瘤）增殖的影响。结果 分离鉴定了8个化合物：β谷甾醇（1），5羟基7，3′，4′，5′四甲氧基黄酮（2），熊果酸（3），d甘露醇（4），栀子苷（5），去乙酰车叶草甙酸甲酯（6），京尼平1β龙胆苷（7），鸡矢藤次苷甲酯（8）。化合物3对3种白血病细胞增殖均表现出了一定的抑制作用，其中对reh细胞系抑制活性最强，ic50为7.5 μg/ml。结论 化合物3具有抗急性淋巴细胞白血病的作用。 【关键词】 栀子 急性淋巴细胞白血病 活性成分 四唑盐比色法 　　abstract:objective to determine the active constituents from gardenia jasminoides against acute lymphoblastic leukemia. methods pounds n chromatographic techniques and their structures s, 1hnmr, 13cnmr). the inhibitory activity against the proliferation of hl60, reh and raji cell lines ined by using mtt assay．results eight pounds ethoxyflavone (2)，ursolic acid (3), dmannitol (4)，geniposide (5), deacetylasperulosidic acid methyl ester(6), genipin1βgentiobioside (7) and scandoside methyl ester (8). pound 3 exhibited inhibitory effects on leukemic cell proliferation in vitro l aginst hl60, reh and raji cell lines, respectively．conclusion ursolic acid might be one of the active ingredients against anti-acute lymphoblastic leukemia conferred by gardenia jasminoides ellis. 　　key inoides ellis；acute lymphoblastic leukemia；active constituents；mtt assay 　　1），5羟基7，3′，4′，5′四甲氧基黄酮（2），熊果酸（3），d甘露醇（4），栀子苷（5），去乙酰车叶草甙酸甲酯（6），京尼平1β龙胆苷（7），鸡矢藤次苷甲酯（8），其中熊果酸对白血病细胞增殖表现较强的抑制作用。. 　　1 仪器与材料 　　 　　fisherjohns熔点仪（未校正），shimadzu ftir8400s红外光谱仪，bruker am 500型核磁共振仪， thermo scientific ltq orbitrap质谱仪，上海亚荣旋转蒸发仪re 2000，spectramax 190酶标仪(美国molecular devices公司)，薄层板和硅胶（青岛海洋化工厂），sephadex lh20为pharmacia产品，其他试剂均为分析纯（mtt,美国sigma公司）。 　　 　　细胞株：hl60人早幼粒细胞白血病、reh人急性淋巴细胞白血病、raji淋巴瘤（北京协和医学院/中国医学科学院基础医学研究所） 　　 　　栀子样品于2008年3月购自北京同仁堂京北康大家园药店，经林余霖研究员鉴定为栀子gardenia jasminoides ellis。植物标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆，编号为r001。 　　2 方法 　　2．1 提取与分离 　　焦栀子（1 kg）经过粉碎，用体积分数95%乙醇回流提取3次，每次2 h，提取液减压浓缩得浸膏100 g，称取硅胶(100～200目)210 g拌样，上硅胶色谱柱,用三氯甲烷甲醇（体积比100∶1～0∶1