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07章节 临床专用自动生化分析仪分析技术

第七章 临床专用自动生化分析仪分析技术;目 录;第一节 浊度自动化分析技术;基本概念;一、浊度分析的基本原理和方法;(一)浊度分析的基础理论;3.光散射理论; 颗粒直径1/10λ Rayleigh 散射 1/10λ颗粒直径≤λ Debye 散射 颗粒直径≥λ Mile 散射;雷莱(Rayleigh)公式: 该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。 当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为: Is为与入射光成θ角处散射光强度;λ和I0为入射光的波长和强度;dn/dc为校正因子,反映了溶液折射指数和颗粒浓度的变化;M为颗粒分子量;c为浓度;N为阿佛加德指数;γ为颗粒到检测器的距离;θ为散射光与入射光的夹角(散射夹角)。 ——散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。;4.免疫浊度分析 在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原-抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度; 当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射; 通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。;(二)浊度分析的基本方法;1.透射免疫浊度法 在光源的光路0o角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。 2.散射免疫浊度法 在光路的5o~90o角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。;1.透射免疫浊度法 (turbidimetric immunoassay) ;免疫胶乳比浊法  用抗体致敏的大小适中、均匀一致的胶乳颗粒(一般为0.2 μm),在遇到相应抗原时,胶乳颗粒上的抗体与抗原特异结合,引起胶乳颗粒凝聚 ,使透射光和散射光即出现显著变化。;透射免疫比浊法;2.散射免疫浊度法;(1)终点散射比浊法 (end-point nephelomtry assay) ;(2)定时散射比浊法 (fixed-time nephelometric assay) ;(3)速率散射比浊法 (rate nephelomtry assay) ;抗原抗体复合物形成的时间与速率   ;;;(4)速率抑制免疫浊度测定法 (rate inhibition immunoturbidimetry) ;二、浊度分析仪的分类和基本结构;(一)浊度分析仪分类;(二)自动散射浊度分析仪的结构;三、浊度分析仪的保养(自学);四、浊度分析的质量控制;(一)抗原过剩校正;抗原抗体结合的剂量关系 ;定时散射比浊法测定原理示意图 ;(二)减少伪浊度;(三)选择合适的入射光波长;(四)抗原抗体反应条件;(五)仪器校正;;五、特定蛋白浊度分析的 临床应用;特定蛋白临床常规项目;第二节 电解质自动化分析技术;基 本 概 念;一、电解质分析的原理和方法;(一)离子选择电极电位分析理论;1. ISE基本结构;2.电极电位产生;3.电极电位测量;4. ISE法的特点; 5. 离子选择性电极法测定的影响因素;(3)温度:温度的变化对离子选择电极电位的影响称为温度效应。主要表现在: ①影响电极的响应斜率、标准电极的截距、溶液待测离子的活度系数以及参比电极电位和液接电位; ②影响电活性物质的溶解度、检出下限; ③影响活性平衡的移动以至溶液中待测离子的浓度发生明显的变化 。(温度、温差) (4)干扰离子:溶液中的共存离子影响反应液的离子强度从而影响了被测离子的测定;共存离子还可与待测离子形成络合物或发生氧化还原反应,导致待测离子的数量减少。;(二)ISE电位分析方法 1.定量方法;2.样本测定方式;二、电解质分析仪分类和结构;(一)电解质分析仪的分类;(二)电解质分析仪的基本结构;湿式电解质分析仪结构框图 ;三、电解质分析仪的维护和保养 (自学);四、电解质分析的质量控制;(一)分析前质量控制 1. 样本的采集与处量;2.抗凝剂与药物的影响;3. 仪器安装;(二)分析中质量控制;4.评价分析性能 仪器、试剂、方法等整个检测系统一旦确定之后,必须对整个系统的不精密度、不准确度、病人结果的可报告范围、分析灵敏度、分析干扰和参考范围等分析性能进行评价; 并建立严格的质量控制规范(包括选用质控品,设定靶值、标准差,绘制质控图,失控情况处理及原因分析等)。;(三)分析后的质量控制;五、电解质分析技术的临床应用;第三节 血气自动化分析技术;前言;一、血气分析的原理和方法;血气分析仪的工作原理框图;1. pH电极;2. PCO2电极;3. PO2电极;在0.65V的极化电压下,电极电流的大小取决于铂阴极表面O2量。 O2在铂阴极表面发生的反应如下: 极限扩散电流的大小决定于渗透到阴极表面

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