第三章层析分离法研讨.ppt

第三章 层析分离法第一节 柱;目的及要求：1.了解层析分离法;1、定义：层析法亦称色谱层析法;色谱分离图示;无标题;层析的发展史年代发明者发明的色;层析分类 分类原则类型特征据溶;以气体作为流动相以液体作为流动;2.按层析的机制分：凝胶层析亲;（1）吸附层析 (;（2）分配层析(partiti;（3）离子交换层析(ion e;（4）凝胶层析（gel chr;（5）亲和层析 (affi;（6）金属螯合层析(metal;（7）疏水层析(hydroph;（8）反相层析(reverse;几种色谱法的异同点 类型机理优;3.按操作形式不同分：柱层析薄;圆形滤纸长条滤纸加展开液纸层析;薄层层析第三章 层析分离法;基本特点：(1) 高选择性；(;第一节 柱色谱1. 吸附柱色谱;一、吸附柱色谱第一节 柱色谱;第一节 柱色谱1、吸附等温线;第一节 柱色谱吸附平衡;第一节 柱色谱2、吸附剂及其;2）常用吸附剂(1) 氧化铝—;第一节 柱色谱(2) 硅胶 ;硅胶可静电吸附可水解的金属离子;第一节 柱色谱(3)聚酰胺 ;形成分子内氢键形成氢键基团多形;第一节 柱色谱3、流动相及其;第一节 柱色谱(2) 吸附剂;第一节 柱色谱二、分配柱色谱;比移值RfR——一个分子单位时;第一节 柱色谱2、分配柱层析;第一节 柱色谱三、柱色谱的操;第一节 柱色谱四、液相色谱的;基本组成和工作流程;常用术语(2) 色谱峰：当某组;无试样通过检测器时，检测到的信;(4) 峰高从色谱峰顶点到基线;(5) 色谱峰区域宽度色谱峰的;①标准偏差?（它是0.607倍;(6) 保留值（Retatio;①保留时间（tR）试样从进样开;②死时间（ t0 ）不被固定相;③调整保留时间（Adjust ;④保留体积（ VR）指从进样开;⑤死体积 （VM） 指色谱柱在;色谱曲线的意义 色谱峰数 = ;第一节 柱色谱2 、容量因子;相对保留值（分离因子）某组分2;右图说明了柱效和选择性对分离的;由此可见，单独用柱效或选择性不;Rs值越大，表明相邻两组分分离;热力学性质动力学性质第一节 ;第一节 柱色谱假设：1. 柱;理论塔板数与色谱参数之间的关系;例：已知物质A和B在一个30.;塔板理论的特点和不足 (1)当;速率理论是在塔板理论的基础之上;H：理论塔板高度（柱效）v：流;?沟流扩散第一节 柱色谱原因;A = 2λdp=Hp dp：;?分子扩散第一节 柱色谱原因;B = 2μDm， Hd=;?传质过程第一节 柱色谱物质;若流动相传质过程缓慢，阻力较大;固定相传质阻力：组分从两相界面;传质阻力系数（C）包含流动相传;液液色谱速率板高方程 分子扩散;（2）流动相流速对理论塔板高度;H – u 曲线与最佳流速： ;速率理论的要点 (1)组分分;可变因素 ;我院使用的仪器：;TOF的基本原理*飞行时间质谱;第二节 纸色谱法 纸色谱法原;原理：根据溶质A在流动相与固定;分离示意图AB上行法原点展开后;原点展开后斑点溶剂前沿xx’y;定性检出氨基蒽醌试样中的各种异;第二节 纸色谱法 （1） 温;（2） 滤纸种类的影响应满足条;滤纸的选用型号 标重(g/m2;h2=Dt（3） 展开距离溶剂;（4） 共存物质及试样溶液性质;（6）层析所用的溶剂 同;（7）展开方式 同一物质;3 比移值的意义（1）物质定性;（3）选择纸条长度例:在某一溶;三 展开溶剂一般采用混合溶剂；;点样滤纸的选择和处理展开分离显;滤纸选择： 质地;2 点样样点位置；样点直径；点;3.平衡 点样以后展开;4 展开展开时必须在密闭的容器;(1) 上行法：将滤纸点样的一;展开剂滤纸下端浸入展开剂约0.;例：氨基酸混合液点在15×15;取出层析纸，画出溶剂前沿晾干或;在层析纸上均匀喷洒显色剂烘3～;用铅笔???出各斑点的轮廓ba1a;6 定量测定对被分离的物质进行;五、应用示例1 对离子系统分析;第二节 纸色谱法 4、5、;第二节 纸色谱法;实验操作 1、纸的处理 ;图1. 点 样 2cm 第二;图2. 滤纸的缝合第二节 ;3、平衡 点样以后将;5、显色 用喷雾器;第三节 薄层色谱原理和特点R;——将固定相在玻璃、聚合物薄膜;薄层色谱高效液相色谱色谱系统开;薄层色谱与柱层析和纸层析比较 ;原点展开后斑点溶剂前沿xx’y;三、操作方法1 薄板的制备薄板;薄层板常用的制作方法有： 1.;薄层分离物质与吸附剂表面及其孔;3 点样 点样时通常使用;b 径向点样c 条状点样d ;径向展开与普通展开的区别第三节;4 展开 点样后的薄层需;a: 水平展开槽b、c: ;无标题;无标题;无标题;