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人教版教学课件吉林省东辽县第1高级中学高中生物人教版选修3《基因工程的基本操作程序》课件
基因工程的基本操作程序;基因工程的基本操作程序主要包括
四个基本步骤:;步骤一:目的基因的获取;1.从基因文库中获取目的基因:;;2.PCR技术;1)反转录法:
以目的基因转录成的信使RNA为模板,反转录成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需的基因。;2)根据已知的氨基酸序列合成DNA法 :;基因表达载体的组成:;启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终获得蛋白质
终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,能终止mRNA的转录
标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的细胞筛选出来; 1)用一定的限制酶切割质粒,使其出现一个切口,露出黏性末端。
2)用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端。
3)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,再加入适量DNA连接酶,形成了一个重组DNA分子(重组质粒);常用的受体细胞:;三、将目的基因导入受体细胞;1.将目的基因导入植物细胞;3.将目的基因导入微生物细胞;(一)、检测;归纳步骤;DNA分子杂交示意图 ;(二)、鉴定(个体生物学水平); 不能,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达。;1)以下说法正确的是 ( )
A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2)不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制 ( )
B、有多个限制酶切点
C、具有标记基因
D、它是环状DNA;3)有关基因工程的叙述中,错误的是( )
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B、 限制性内切酶用于目的基因的获得
C、目的基因须由运载体导入受体细胞
D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;4)有关基因工程的叙述正确的是 ( )
A、限制酶只在获得目的基因时才用
B??重组质粒的形成在细胞内完成
C、质粒都可作为运载体
D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是 ( )
A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合
C、将目的基因导入受体细胞
D、目的基因的检测和表达
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