羽衣甘蓝_EM_ARC1_EM_的基因分离、表达及与SRK相互作用的分析.pdf

园 艺 学 报 2011，38（12）：2342–2348 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 羽衣甘蓝 ARC1 的基因分离、表达及与 SRK 相 互作用的分析 蓝兴国，杨 佳，赵 昕，李玉花* （东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040） 摘 要：以羽衣甘蓝（Brassica oleracea var. acephala）自交不亲和系（S13-bS13-b）为试验材料，利用 RT-PCR 的方法分离其 ARC1 基因 cDNA 序列（命名为 BoARC1，GenBank 登录号为 EU344909）。BoARC1 cDNA 序列中含有 1 个 1 992 bp 的开放读码框（ORF），编码 1 个含有 663 个氨基酸的蛋白质。羽衣甘蓝 BoARC1 与油菜 BnARC1 的氨基酸序列具有 94%的一致性；Southern 杂交结果显示 BoARC1 在基因组中 只存在单一拷贝；Northern 杂交结果显示 BoARC1 特异性地在柱头组织中表达；在酵母双杂交试验分析中， BoARC1 能够与 SRK3、SRK13-b 和 SRK910 的胞内激酶域发生相互作用。 关键词：羽衣甘蓝；自交不亲和；ARC1；相互作用 中图分类号：S 681.9 文献标识码：A 文章编号：0513-353X（2011）12-2342-07 Isolation，Expression of ARC1 from Ornamental Kale and Interaction Analysis Between ARC1 and SRK LAN Xing-guo，YANG Jia，ZHAO Xin，and LI Yu-hua* （College of Life Sciences，Northeast Forestry University，Harbin 150040，China） Abstract：The ARC1 cDNA sequence was isolated from stigma of ornamental kale（Brassica oleracea var. acephala）S13-bS13-b homozygotes using RT-PCR techniques，named BoARC1（GenBank accession No. EU344909）. The BoARC1 cDNA sequence had an ORF of 1 992 bp，encoding a 663-aa protein. The deduced amino acid sequence of isolated BoARC1 shared 94% identity with Brassica napus ARC1. Southern blot analysis showed that there was a single copy of BoARC1 gene in genome. Northern blot analysis showed that BoARC1 mRNA only expressed in the stigma. The yeast two-hybrid analysis indicated that the BoARC1 interacted with SRK3，SRK13-b and SRK910. Key words：Brassica oleracea var. acephala；self-incompatibility；ARC1；interaction 自交不亲和性（Self-incompatibility，SI）是显花植物采取的一种避免自交，促进种内遗传多样 性的机制（Franklin-Tong，2008）。芸薹属植物 SI 反应是由花粉外壁蛋白 SCR（S-locus