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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因多态性分型研究的论文.doc
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因多态性分型研究的论文
【摘要】 目的探索一种准确、快速、可靠的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(mrsa)的分子生物学分型方法,了解医院内mrsa的多态性,为临床合理、有效地使用抗生素和控制耐药基因在种群间的传播提供帮助。方法用meca基因相关高变区pcr扩增(hvr-pcr)和随机扩增多态性dna(rapd)两种方法,对mrsa菌株进行多态性分析。hvr-pcr检测meca基因相关高变区正相重复序列元件(drus)的长度,根据drus数目的不同对mrsa分型;rapd根据电泳图谱中条带的数目及位置,经ntsys统计软件进行聚类分析,得到遗传树状图,按mrsa菌株之间的相关性进行分型。结果应用hvr-pcr方法可将31株mrsa标本分为7型,分别含有7、8、9、10、11、12和16个drus,其中10drus型最多\[11/31(35.48%)\],16drus型最少\[1/31(3.23%)\];应用rapd分型,31株mrsa共分10型,其中以ⅳ型为主\[10/31(32.26%)\],其他型分布比较接近。在11株hvr-pcr分型的10drus型中rapd ⅳ型4株\[4/11(36.36%)\],rapd ⅲ型和rapd ⅳ型各2株\[2/11(18.18%)\];10株rapd ⅳ型中9drus型、10drus型各4株\[4/10(40.00%)\]。结论rapd方法和hvr-pcr方法对mrsa的分型率都比较高,而且这两种方法都比较简单、稳定、可靠、快速,实用性强,具有广阔的应用前景。.
【关键词】 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;meca基因;随机扩增多态性dna;meca基因相关高变区pcr扩增
abstract: objectiveto investigate the polymorphisms of methicillin-resistant staphylococcus aureus (mrsa) in local hospitals in order to provide evidence for clinical doctors to use the antibiotics rationally and effectively.methodsorphisms of mrsa ethods of pcr for mec-associated hypervariable region (hvr-pcr) and random amplifiedpolymorphic dna (rapd). mrsa strains typed by hvr-pcr according to the length polymorphisms ber of direct repeat unit elements (drus) of hvr-pcr products; grouping of mrsa by rapd ong different mrsa isolates.resultstotally 31 mrsa strains typed by hvr-pcr rsa strains ost predominant, present in 11/31 cases (35.48%). among the 31 mrsa strains typed by hvr-pcr, only 1 shorsa strains.the dominant type ilar distribution.conclusionrapd and hvr-pcr methods not also possess a good ability to obtain interpretable results, but also are simple, stable, reliable and rapid. they both have perfect practicality and prospect of extensive application.
key ethicillin-resistant staphylococcus aureus; meca gene; random amplified polymorphic dna; pcr for the mec-associated hypervariable region
葡萄球菌的分型方法很多,传统的分型方法包括血清学分型、抗生素分型等,但均无法满足精确辨别的要求。分子生物学技术的出现为这一领域带来了革命。目前,分子分型方法已成为研究细菌耐药性发生及传播的重要手段,常见的有:脉冲场凝胶电泳(pulsed-fiel gel electrophoresis, p
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