不同固定液对子宫内膜标本制片影响的对比性研究的论文.docVIP

　　不同固定液对子宫内膜标本制片影响的对比性研究的论文 【摘要】 目的 对比性研究bouin液和4%中性甲醛固定液对子宫内膜标本固定性能。方法 选用2种固定液对新鲜子宫内膜标本固定2小时后，常规脱水、浸蜡、包埋、制片并进行对比性观察。结果 对36例功血患者子宫内膜切片比较性研究，经bouin液固定后所制切片较4%中性甲醛固定液所制切片多个方面观察研究具有显著的优势。结论 经bouin液固定的子宫内膜标本，具有优良的制片质量，对于需要尽快取得病理诊断报告的患者，选用bouin液固定标本可以在较短时间内得到高质量病理切片。 【关键词】 bouin液 4%中性甲醛固定液 子宫内膜 职称论文 病理技术是病理学研究和诊断不可分割的一部分，各种各样的病理技术能够精细地显示与表达病变区域的细胞组成、组织结构以及基因序列的变异等多层次的信息。为病理学研究和诊断提供更加科学、准确??可靠的形态学依据，提高了诊断正确率，便于临床对患者的及时准确的治疗。在所有工作中，组织固定是病理标本制备的第一步，至关重要，是所有病理后续工作的基础。 在日常工作中，子宫内膜标本的制片一直是病理工作中的一个难点，由此我们尝试采用不同的固定方法，研究如何避免因组织不能充分固定，导致制片质量差，诊断困难的现象。自2008年3月开始，我们分别用bouin液和4%中性甲醛固定液对36例子宫功能性出血患者的子宫内膜组织作了对比，效果满意。 1材料与方法 1.1.材料 子宫内膜标本来源于2008年3月-2009年11月本院妇产科门诊的功能性出血患者36例。年龄21~65岁，经询问病史及诊查后，未发现有周身及生殖器官器质性病变。.cOm患者主要临床表现为月经过多，经期延长7天以上，月经紊乱，不规则子宫出血，闭经后子宫出血。 1.2主要试剂 4%中性甲醛固定液（饱和甲醛溶液10ml+ph7.4mol/l磷酸缓冲液90ml），bouin固定液（苦味酸75ml+40%甲醛溶液25ml+冰醋酸5ml），乙醇，二甲苯，盐酸及石蜡等。 1.3方法 将配好的bouin液和4%中性甲醛固定液交给临床医师保存。同一患者刮取的内膜组织，立即分别放入2种固定液中。固定2小时后，经4%中性甲醛固定液的组织按常规石蜡包埋。经bouin液固定的组织用70%~80%乙醇洗涤，去除组织中苦味酸染色，然后按常规石蜡包埋。最后两者制片效果及组织切片he染色，显微镜下作一比较。 1.4统计学分析: 结果均以平均数±标准差（±s）表示，采用spss11.5统计学软件分析，两组间比较用t检验。 2结 果 2.1肉眼观察 见子宫内膜组织入bouin液立即由红色变白色，而入4%中性甲醛固定液中则是逐渐由红变白。 2.2石蜡切片过程 用bouin液固定过的组织蜡块，组织质地硬度适当，切片连续，完整，切片合格率99%（plt;0.005）；用4%中性甲醛固定液过的组织蜡块，组织质地较软，切片不连续，不完整，切片合格率70%（plt;0.005）。 2.3显微镜（物镜*40）下观察：用bouin液固定过的组织的he染色色彩亮丽，对比清晰，子宫内膜腺体细胞与间质细胞结构清晰，组织结构分明（图1）；高倍镜下细胞结构也很清晰（图2）。4%中性甲醛固定液固定过的组织色彩较暗，对比不够清晰，子宫内膜腺体细胞与间质细胞结构较模糊，组织结构比较分明（图3）；高倍镜下细胞结构不清晰（图4）。 3.讨 论 组织的固定是形态学研究中不可缺少的重要步骤，其目的:（1）抑制细胞内溶酶体酶的释放和活性，防止自溶；抑制组织中细菌的繁殖，防止组织腐败；（2）使细胞的蛋白质、脂肪、糖、各种成分凝固成不溶性物质，以防止物质扩散并维持原有的组织形态结构；（3）固定后的组织对染料有不同的亲和力，染色后的组织其构成比有较大的差别，因此对固定剂的要求不同。（4）有利于切片，固定剂有硬化作用，使组织硬度增加，是细胞的正常的半液体状变为半固体状，有固化作用，便于制片。 本研究显示有效而充分的固定是保存子宫内膜组织结构的关键，直接关系到病理诊断的准确性。4%中性甲醛固定液虽然是一种常用的良好固定液，渗透力强、组织收缩小，甲醛对组织穿透力强，对低分子的多肽、蛋白、糖、脂肪、高尔基体和线粒体等固定效果较好，细胞核的染色佳。然而甲醛易氧化为甲酸，降低固定效果，使溶液变酸，过酸会影响核的染色。此外固定时间过长，组织中可产生甲醛色素影响观察，也可使某些抗原发生空间构象改变而遮蔽抗原决定簇【1】，由于甲醛渗透速度较慢，一般的组织需固定4~12h，对厚度适当的组织固定较为均匀，但对活检一类的组织固定后再用乙醇脱水会使组织较硬，并且对染色质的固定效果差。当新鲜的子宫内膜组织入甲醛固定液中时，肉眼可见组织颜色是逐渐由红变白，由此说明4%甲醛渗透速度慢。两组标本用同一种苏木精染色，但染色后色彩不够