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　　侧脑室注射吡咯喹啉醌对大鼠学习记忆的影响的论文 侧脑室注射吡咯喹啉醌对大鼠学习记忆的影响 【关键词】 pqq;学习记忆;海马 【摘要】 目的 观察吡咯喹啉醌(pqq)对大鼠学习记忆能力的影响。方法 侧脑室注射pqq，60 d后用水迷宫仪进行定位航行和空间探索实验，行脑组织切片，用免疫组化法和emory performance of rats. methods pqq inistered into the rat lateral ventricle. after 60 days the rats munohistochemical staining. the expression of nerve gro e in platform in quadrant 1 and mist ring bers of positive neuron cell contained the nestin protein in hippocampal tissue ore than those of control group. pqq could irritate the expressions of ngf and its receptor trka. conclusions pqq could improve the groent of hippocampal tissue and the learning and memory performance of rats. 　　【key emory performance; hippocampus 　　吡咯喹啉醌(pqq) 作为氧化还原酶辅酶参与生物机体多种氧化还原反应，它存在于植物、动物体内，人体组织和体液中也存在微量pqq。.pqq还具有重要的生物活性和功能，如刺激微生物、人体细胞生长和植物发育〔1〕;影响鼠肝脏线粒体成分的含量和功能及糖和氨基酸的代谢〔2〕;pqq及其衍生物刺激离体培养的神经细胞、神经胶质细胞和活体鼠脑合成和释放神经生长因子(ngf)〔3〕;在离体的条件下，连接于淀粉纤维上，防止神经淀粉纤维瘢痕的形成〔4〕;降低由6羟基多巴胺介导的自由基产生以降低其神经毒性作用〔5〕，降低由大脑中动脉阻塞引起的神经组织的坏死和行为障碍〔6〕。本研究行侧脑室注射pqq，观察pqq对大鼠学习记忆能力的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　pqq(sigma公司)以生理盐水溶解，兔源的抗胆碱乙酰基转移酶(chat)、巢蛋白(nestin)和酪氨酸激酶(trka)(武汉博士德公司)，抗ngf，羊抗兔二抗(北京中杉金桥)，1月龄雄性的m，旁开1.8 mm，深4 mm处行侧脑室注射。①正常对照组：侧脑室注射生理盐水20 μl，每10天一次。②侧脑室注射小剂量pqq组：侧脑室注射pqq 10-5mol/l 20 μl，每10天一次;③侧脑室注射较大剂量pqq组：侧脑室注射pqq 10-4mol/l 20 μl，每10天一次。④侧脑室注射大剂量pqq组：侧脑室注射pqq 3×10-3mol/l 20 μl，每10天一次。1 min内注射完毕，留针2 min。 　　1.2.2 神经行为学检测定位航行实验和空间探索实验 　　取用药后60 d的大鼠置于120 cm的圆形水箱中，计算机软件将圆桶以圆点为中心，等分为内中外三个环，平台置于中环;以圆点画“+”将圆桶等分为四个象限，以平台所在处为第一象限，顺时针走向分别为第二、第三和第四象限，水温22℃，水为乳白色，平台置于水面下2 cm处。动物学习找水面下的平台：先将动物置于平台上6 s，然后将动物抛于水中，让大鼠自已找平台，如2 min内没找到平台，则再将动物置于平台上6 s后再抛入水中，至动物能自已在2 min内找到平台为止，并记录动物学习找平台所需的次数。2 d后进行应用morris水迷宫仪，进行定位航行实验，将大鼠放于水箱中，记录大鼠在2 min内找到水面下平台所需要的时间(潜伏期)。撤掉迷宫仪中平台，进行空间探索实验，观察鼠在2 min内在迷宫中寻找平台的运行轨迹。 　　1.2.3 海马组织切片的制作 　　取用药后60 d的大鼠，麻醉后经左心室灌注生理盐水和4%多聚甲醛，断头取脑，置于固定液中固定，石蜡包埋，连续石蜡切片，切片厚度8 μm以备用。 　　1.2.4 p)显色剂显色。 　　1.2.5 免疫组化分析nestin蛋白、trka的表达 　　取切片厚度8 μm的石蜡切片，二甲苯脱蜡，加兔源的抗nestin和trka抗体(1∶50)4℃孵育过夜，滴加羊抗兔igg 30 min，二氨基联苯胺(dab)显色，苏木素复染。 　　2 结 果 　　2.1 定位航行和空间探索实验结果 　　与对照组相比，pqq处理后，大鼠学习找平台所需的次数减少和