干细胞培养.PDFVIP

干 细 胞 培 养 近年来，干细胞不止是生命科学和医学研究的热点，也常是人们茶余饭后的谈资。从布什否决 干细胞研究法案到黄禹锡造假风波，干细胞研究总是占据报纸的大幅版面。为什么这么热门？因为 干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞，有望用来修复那些被疾病和创伤所破坏的各种各样 的细胞和组织，从而为多种慢性疾病的治疗带来了希望，例如帕金森病、老年痴呆症、糖尿病、心 血管疾病，甚至癌症。 干细胞根据细胞来源的不同，可分为胚胎 最初的胚胎干细胞培养都少不了小鼠胚 干细胞和成体干细胞两大类。当受精卵分裂发 胎成纤维（MEF）细胞制备的滋养层。MEF 育成囊胚时，内层细胞团（Inner Cell Mass） 向培养基中分泌一些未知因子，能支持干细胞 的细胞即为胚胎干细胞。胚胎干细胞具有全能 生长。后来，研究人员发现在培养小鼠 ES 细 性，可以自我更新并具有分化为体内所有组织 胞时，向培养基中添加白血病抑制因子（LIF） 的能力。进一步说，胚胎干细胞（ES 细胞） 可以代替滋养层细胞而维持 ES 细胞的自我 是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能 更新能力，但 LIF 并不能维持人类胚胎干细胞 性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包 （hESC）的未分化状态。因此大部分实验室 括生殖细胞。成体干细胞是指存在于组织中的 还在使用细胞滋养层。然而，MEF 细胞在体 未分化细胞，该种细胞能够自我更新并能够分 外的增殖能力较差，且随着传代次数增加，其 化形成组成该类组织的细胞，包括间充质细 支持 hESC 生长的能力降低，需要不断地制 胞、造血干细胞、神经干细胞等。成年动物的 备原代 MEF 细胞，昂贵、费时。而且鼠源性 许多组织和器官，比如表皮和造血系统，具有 的 MEF 可能引起动物源性病原体或支原体的 修复和再生的能力，成体干细胞在其中起着关 污染，因此很多研究组尝试用各种人源细胞直 键的作用。然而与胚胎干细胞不同的是，这种 接作为饲养层。但也不是所有人源细胞都能很 干细胞在培养时生存时间有限制并且只能分 好地支持 hESC 的生长，而且用异体来源的 化成有限的几种细胞类型。 细胞仍存在一定的交叉污染危险。基于这些原 因，研究人员希望能开发出无滋养层、无血清、 目前干细胞有几百种之多，而且它们的培 成分确定的 hESC 培养体系。 养特性也各异，就重复性而言，干细胞培养领 域还面临着极大的困难。为干细胞提供一个最 BD 生物科学公司、加拿大 StemCell 公 佳的培养条件，尤其是保证细胞处于未分化状 司就和著名的 WiCell 研究所建立了战略合作 态或者在需要的时候使细胞向专一的方向分 关系，开发出更优化、无滋养层的人胚胎干细 化，是干细胞研究中最大的挑战。 胞培养环境，包括成分确定的无血清培养液和 合适的培养基质。 干细胞的培养 第 1 页，共 17 页