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-ml细胞培养基或「CELLOTIONTM」
STEM-CELLBANKER? 使用方法
人胚胎干细胞和人诱导多能干细胞冻存方法（参考例）
冻存
1. 按照常规方法收集干细胞于冻存管中
2. 不进行细胞离心步骤，使用吸液器弃去细胞培养基 *1。
3. 直接添加 500μL 预先 4℃冷却的 STEM-CELLBANKER? *2 至细胞冻存管中。
4. 将细胞冻存管置于预先 4℃冷却的程序降温盒*3 后，将该程序降温盒放入负 80℃冰箱。
5. 翌日，将已冻结的细胞冻存管移置于负 196℃液氮罐。
※进行上述第 5 和第 6 步骤时速度要快。
＊1：可 收集干细胞于离心管中，再以 300rpm(20G) 条件进行离心弃去上清液。少量残存的
细胞培养基对冻存结果影响不大。
＊ 2 ： 预 先 添加 Rho-associated kinase (ROCK) inhibitor 和 Y-27632 (Merck) 于
STEM-CELLBANKER? （调配至最终浓度＝10μM) ??助提高复苏细胞存活率。
＊3：可使用 Nalgene Freezing Container “Mr. Frosty” (5100-0001) (Nalge Nunc)或
BICELL DEWAR FLASK (Nihon Freezer)等程序降温盒。
复苏
1. 从冰箱里取出细胞冷冻保存管后立即放入 37℃振动水浴槽中快速解冻。
2. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即使用 8 - 1 0 m l 细胞培养基或 「CELLOTIONTM」
細胞洗涤回収液*1 离心洗涤细胞*2。
3. 吸弃上清液后加入适量培养基吹打均匀。
4. 将细胞液移至细胞培养瓶，按常规方法进行培养。
＊1：使用「CELLOTIONTM」清洗细胞有助于提高细胞回收率。
http://www.zenoaq.jp/cellbanker/ja/cellotion.html
＊2：参考离心条件为 300G、5～10 分钟。
产品保存方法
保存于 2－8℃环境中。质量保障期从产品的生产日期起算，为期 3 年。
对开封后产品进行长期（3 个月以上）保存时，推荐分装小瓶后存放于－20°C 冰箱。
3 次以上的重复冻结-解冻过程可能劣化产品质量和导致性能降低，须避免。
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