液相微萃取或后萃取技术在中药苯丙酸类化合物分析中的使用的论文.docVIP

　　液相微萃取或后萃取技术在中药苯丙酸类化合物分析中的使用的论文 摘要】 　　初步阐明了液相微萃取/后萃取(lpme/be)在苯丙酸类化合物中的萃取机理；建立了浓缩倍数与模型化合物分配系数及理化参数之间的关系。利用自制的液相微萃取装置，优化了lpme/be条件：以聚偏氟乙烯纤维（mof503）为溶剂载体，正庚醇为萃取剂，ph 3.0的hcl分析物水溶液为供相，ph 11.7的naoh为接受相，搅拌速度为1800 r/min，萃取时间为60 min。萃取完成后经hplc分析。模型化合物浓缩倍数ef与其正庚醇/水表观油水分配系数logp有良好线性，r2=0.9653。测得该方法的rsd内＜6.3%，rsd间＜6.6%；检出限为咖啡酸0.025 μg/ｌ；阿魏酸0.250 μg/ｌ；对羟基桂皮酸0.004 μg/ｌ；对甲氧基桂皮酸0.100 μg/ｌ；桂皮酸0.050 μg/ｌ。双黄连口服液中咖啡酸平均回收率为100.3%；浓缩当归丸中阿魏酸平均回收率为99.2%；桂枝茯苓丸中桂皮酸平均回收率为99.4%。本法操作简便、快速、环境友好，能有效去除中药样品中复杂机体的干扰。 【关键词】 液相微萃取/后萃取 高效液相色谱 苯丙酸类化合物 萃取机理 分离优化模型 　　1 引言 　　苯丙酸类化合物主要是桂皮酸的衍生物(结构见图1)。由于羟基在苯环上的数目、排列方式和甲基化程度不同，这类化合物的性质差别较大。.文献中报道有关该类化合物的前处理多用溶剂萃取[1～3]，加热回流和索氏提取等方法，这些方法费时且有机溶剂用量大。余燕影等[4]研究了离子液体萃取阿魏酸和咖啡酸的性能和条件。本实验用液相微萃取/后萃取(lpme/be)方法[5～8]建立了5种苯丙酸类化合物——咖啡酸、阿魏酸、桂皮酸、对羟基桂皮酸和对甲氧基桂皮酸（结构式见图1）的前处理方法，并初步阐明了该类化合物的“电荷转移超分子”萃取机理，建立了浓缩倍数与理化参数间的关系，为该类化合物的提取、分离、纯化和浓缩提供了理论依据；与高效液相色谱法相结合，测定了双黄连口服液中咖啡酸，浓缩当归丸中阿魏酸和桂枝茯苓丸中桂皮酸的含量，准确度与精密度都达到了分析方法的要求。lpme/behplc法可以为该类化合物的质量控制提供一种有效、经济、绿色且快速的前处理方法。 　　图1 苯丙酸类化合物化学结构式（略） 　　fig.1 chemical structure of phenylpropionicacids 　　桂皮酸（methoxy cinnamic acid）： r1=r2=h； 咖啡酸（caffeic acid）： r1=r2=oh； 阿魏酸（ferulic acid）： r1=oh, r2=och3； 对羟基桂皮酸（phydroxycinnamic acid）：　r1=oh, r2=h；　对甲氧基桂皮酸（cinnamic acid）：　r1=och3, r2=h。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　lcvp高效液相色谱仪（日本岛津公司），聚丙烯纤维（天津大学化工学院膜研究所），聚偏氟乙烯中空纤维（mif503，内径为0.8 mm，孔径为0.1μm），聚偏氟乙烯中空纤维（mof503）及其它纤维（天津膜天膜工程技术有限公司，内径为0.8 mm，孔径为0.2 μm）。咖啡酸对照品、阿魏酸对照品和桂皮酸对照品均为中国药品生物制品检定所提供;对羟基桂皮酸对照品和对甲氧基桂皮酸对照品为武汉远城科技发展有限公司提供，双黄连口服液（哈药集团三精制药股份有限公司）; 浓缩当归丸（河南宛西制药股份有限公司），桂枝茯苓丸（山西天生制药有限责任公司）。正构醇（分析纯，天津市光复精细化工研究所）。实验用水为二次蒸馏水，其它试剂均为分析纯。 　　2.2 实验方法 　　2.2.1 色谱条件 c18柱（250 mm×4.6 mm i.d.， 5 μm， dikma technologies, kromasil 100），检测波长为285 nm，流速为1.0 ml/min，柱温28 ℃，进样量为20 μｌ，流动相为ｖ（甲醇）∶ｖ（0.3% ｈ３ｐｏ４）＝53∶47。 　　2.2.2 溶液配制 精密称取5种化合物各10.0 mg，用甲醇溶解并稀释，制成浓度为1.0 g/ｌ的对照品储备溶液，4 ℃冰箱保存，备用。 　　2.2.3 实验步骤 将放有微型搅拌磁子的细长小玻璃管固定于磁力搅拌器上，加入2 mｌ样品溶液。将10 cm长的中空纤维管洗净吹干后在正庚醇中浸泡10 s，使其孔壁充满正庚醇，然后用注射器推出纤维管内多余的正庚醇，将此中空纤维管弯曲成u形并注入ph 11.7的naoh溶液，浸入到样品溶液中，开启磁力搅拌器，在1800 r/min搅拌速度下萃取60 min，萃取结束后收集接受相，进行hpl