独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究的论文.docVIP

　　独一味胶囊镇痛、止血作用的实验研究的论文 【摘要】通过观察独一味胶囊对小鼠镇痛作用与血清、脑组织中no含量的影响，以及对小鼠出血时间和血浆复钙时间的影响，得出结论：独一味胶囊能显著提高小鼠痛阈值，降低小鼠血清及脑组织中no水平，明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间，表明独一味胶囊具有良好的镇痛、止血作用。 【关键词】独一味胶囊镇痛止血一氧化氮（no） 独一味胶囊是《中国药典》收载的经典中成药，具有活血止痛、化瘀止血的功能。本文主要对独一味胶囊进行了镇痛、止血新机理探讨和研究，进一步阐明独一味胶囊镇痛、止血的作用机理，从而为临床药物的使用提供实验依据。 1材料 1.1对象选用健康3～5周龄昆明种小鼠150只，雌雄各半，体质量24～26g，购于成都中医药大学实验动物中心。整个实验过程小鼠自由饮食饮水，于室温（22±2）℃、24小时饲养环境中光照12小时，黑暗12小时条件下饲养。 1.2试剂及仪器独一味胶囊（dyg/kg，中剂量为462.86mg/kg，低剂量为231.43mg/kg；阿司匹林（aspl，陕西汉王药业有限公司，批号：070416）；l-精氨酸（l-arg）（北京化学试剂公司，批号：070112）；l-硝基精氨酸甲酯（l-name）（美国sigma公司）。.紫外可见分光光度计（日本岛津），柠檬酸钠溶液、生理盐水、氯化钙溶液等。 2方法 2.1对小鼠镇痛作用及血清和脑组织no含量的影响 2.1.1以小鼠痛阈的影响 2.1.1.1浸尾法（45℃）检测痛阈昆明种小鼠50只，随机分为5组：dyg/kg）、dyg/kg）+l-arg（200mg/kg）、dyg/kg）+l-name（37.5mg/kg）、aspl组（200mg/kg）、对照组（生理盐水）。将小鼠尾尖部3cm处用苦味酸做一标记，并将这一部位浸入45℃热水中，以鼠尾缩出水面为痛反应指标，以鼠尾浸入水中至缩出水面的时间为痛阈。首先测定基础痛阈（间隔10min测定2次痛阈，以2次均数为基础痛阈）。然后各组依次分别：dye腹腔注射（ip）、aspl灌胃（ig）、生理盐水灌胃（ig）。药后30分钟、60分钟分别按药前方法测定药后痛阈。实验结束后，摘小鼠眼球取血，3500r/min离心15分钟，取血清。取血后快速处死小鼠取脑称质量，加入适量生理盐水低温（冰水浴中）制成脑组织匀浆。血清和脑组织匀浆均置于-20℃冰箱保存待测。 2.1.1.2血清及脑组织no含量的测定按试剂盒说明采用硝酸还原酶法进行操作，检测血清和脑组织中的no含量，于550nm处用griess法测定。 2.2对小鼠出血时间及血浆复钙时间的影响 2.2.1对出血时间的影响[1]取22～25g小鼠45只，雌雄各半，随机分为生理盐水组、药物高、中、低剂量组，共4组，禁食禁水24小时，按0.02ml/g体质量分别灌胃给予生理盐水和相应剂量的药物。45分钟后剪去鼠尾3mm便有血液流出，立即计时，每隔10s用滤纸轻轻拭血1次，直至拭后不再出血为止。从开始出血到出血停止，所经历时间即为小鼠出血时间。 2.2.2对血浆复钙时间的影响[2]取22～25g小鼠45只，雌雄各半，实验分组同上，禁食禁水24小时。摘眼球取血1ml，放入加有0.1ml柠檬酸钠溶（38mg/ml）的离心管内，混匀后以1000r/min离心10分钟，取内径8mm试管1支，加入混合血浆和生理盐水各80μl，随即放入37℃水浴中温浴2分钟，然后加入80μl氯化钙溶（2.8mg/ml），混匀后再放入37℃水浴中，立即计时，记录自加钙后至纤维蛋白形成、液面不动所需时间，即为生理盐水组血浆复钙时间。将生理盐水换成独一味胶囊药物高、中、低剂量，按相同方法和条件测出各组的血浆复钙时间。 2.3统计学处理应用spss10.0软件??行统计学处理。数据以x-±s表示，组间比较采用t检验，plt;0.05表示有统计学差异。 3结果 3.1对小鼠镇痛作用及血清、脑组织中no含量的影响 3.1.1对小鼠痛阈的影响结果显示：dye可部分增强独一味胶囊的镇痛作用。同时独一味胶囊可明显降低小鼠血清和脑组织中no含量，提示独一味胶囊的镇痛作用机制与降低体内过量的no有关。对于小鼠止血实验表明，独一味胶囊能明显缩短小鼠出血时间及血浆复钙时间，说明独一味胶囊具有明显的止血作用。