LC_ESI_MS法测定混合二元酸三种主要组分含量.docVIP

LC-ESI-MS法测定混合二元酸三种主要组分含量  HYPERLINK 首席医学网 ???? 2010年03月26日 20:49:47 Friday?? 8 ? 作者：于晓敏，王贤亲，何文斐，胡淑萍，楚生辉，贾娟，王秀勇，叶发青????作者单位：温州医学院 药学院，浙江 温州 325035  ?  HYPERLINK /qikan/article_collect.php?id=519822 加入收藏夹 【摘要】? 　　目的 ：建立LC-ESI-MS测定混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸含量的方法。方法：色谱条件：色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18（2.1 mm×150 mm，5μm），流动相为甲醇:0.1%甲酸=10:90(V/V)，柱温25 ℃，流速0.4 mL/min。质谱条件：ESI（电喷雾离子源），负离子模式检测，选择离子监测(selected ion monitoring，SIM)方式定量，监测离子峰分别是丁二酸m/z 117，戊二酸m/z 131，己二酸m/z 145。结果：丁二酸、戊二酸和己二酸在0.2～20μg/mL范围内线性关系良好（r =0.99204、0.99257、0.99327），三种二元酸的最低检测极限都是0.05μg/mL，加样回收率在97.15%～99.23%范围内，精密度RSD≤2%（n =5）。测得混合二元酸样品中丁二酸、戊二酸和己二酸的含量分别为37.28%、33.40%和14.15%，三者合计84.83%。结论：该方法准确，灵敏度高，稳定快速，且重现性好，适合于混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸含量的测定。 【关键词】? LC-ESI-MS 分离 丁二酸 戊二酸 己二酸 含量 　　混合二元酸是环己烷氧化制己二酸生产过程中的副产品，其中含有丁二酸、戊二酸、己二酸等组分，其组成复杂[1]，而这三种二元酸都是重要的有机化工原料，对混合二元酸的组成进行测定、分离后重新利用，有很重要的社会价值和经济意义。据文献报道称混合二元酸组成的测定方法有反相高效液相色谱内标法[2]、气相色谱酯化法[3]、反相离子对色谱法[4-5]、高效液相色谱外标法[6]、高效液相色谱面积归一法[7]和液质联用法[8]。本研究用液质联用法采用选择离子监测技术检测丁二酸、戊二酸、己二酸，与上述方法比较具有灵敏度高、选择性好等优点。在确定了线性范围基础上制定了线性回归方程，测定了混合二元酸中丁二酸、戊二酸和己二酸的百分含量，为大规模分离混合二元酸提供了参考。 　　1? 材料和方法 　　1.1? 仪器与试药? 　　德国Bruker公司Esquire HCT质谱仪，配ESI（电喷雾离子源），美国Agilent 1200 HPLC，电子天平（JY5002型，上海精密科学仪器有限公司），甲醇（德国Merck公司），甲酸（优级纯，美国Tedie公司），水（法国Millipore超纯水系统），丁二酸、戊二酸、己二酸（均为国产分析纯）。 　　1.2? 分析条件? 　　质谱条件：ESI（电喷雾离子源），负离子检测，雾化气压力设为30 psi；干燥气（N2）流速设为7 L/min，干燥气温度设为350 ℃。选择离子监测(selected ion monitoring，SIM)方式定量，丁二酸[M-H]-m/z 117，戊二酸[M-H]-m/z 131，己二酸[M-H]-m/z 145。色谱条件：Agilent Zorbax SB-C18柱（2.1 mm×150 mm，5μm），流动相：甲醇:0.1%甲酸=10:90(V/V)，柱温25 ℃，流速：0.4 mL/min，进样量为10μL。 　　1.3? 标准品和样品溶液制备? 　　标准溶液的制备：分别精密称取丁二酸、戊二酸和己二酸标准品0.1003 g、0.1003 g、0.1004 g，加水溶解，转移到100 mL容量瓶中，定容，摇匀，配制成1 000μg/mL的混合二元酸标准储备液，于阴凉处保存。临用前以水稀释成各种浓度的标准溶液。 　　待测样品溶液的制备：精密称取混合二元酸样品0.0500 g，加水溶解，转移到100 mL容量瓶中，定容，摇匀，配制成500μg/mL的样品储备液，于阴凉处保存。临用前以水稀释成各种浓度的待测溶液。 　　2? 结果 　　2.1? 丁二酸、戊二酸和己二酸质量色谱图? 　　在1.2 分析条件下，三种化合物分离效果较好，结果显示丁二酸、戊二酸和己二酸的保留时间分别为1.7 min、2.7 min和6.3 min，见图1，所对应的质谱图见图2。 　　2.2? 待测混合二元酸样品组成成分的定性检测? 　　结果显示在1.7 min、2.7 min和6.3 min有显著的峰形，同2.1结果比较可知，待测样品溶液中含有丁二酸、戊二酸和