临床检验_隐血试验.docVIP

东莞常平医院 临床检验实验室 文件编号： DGCPH-CL-SOP-07-22 隐血试验版序：2005-1页码：第1 页，共3 页 上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故称为隐血。 [标本采集与处理] 用洁静的容器，盛装小量的待检标本，立即送检。 [质量控制品] 配制 3 %红细胞悬液。 [操作步骤] 一、免疫学检测法 （一）检测原理 大便或其它液体隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。因此，本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食肉类。 （二）操作步骤 取一片洁净干燥的载玻片，滴加2—3滴蒸馏水，取粪便小许，调成均匀混悬液。取便隐血试纸条，按说明书操作，将试纸条的反应端浸湿。在5min内观察结果。若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性；若只有C线呈色为阴性；若丁线与C线均不显色，说明试验无效。 （三）质量控制 1．敏感性和特异性 (1)敏感性： 样品中血红蛋白浓度超过0.2μg／m1，就可得到阳性结果。 (2)特异性： 便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验，样品中若含有如下干扰物，实验结果不会受影响： 东莞常平医院 临床检验实验室 文件编号： DGCPH-CL-SOP-07-22 隐血试验版序：2005-1页码：第2 页，共3 页 鸡血红蛋白 500μg／ml 牛血红蛋白 500μg／m1 马血红蛋白 500μg／ml 猪血红蛋白 500μg／m1 羊血红蛋白 500μg／m1 兔血红蛋白 500μg／m1 辣根过氧化酶 200μg／m1 2．试验局限性 (1) 本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变，然而，由于家族性息肉或直肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀，都可造成阴性结果。 (2) 本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道的药物造成便潜血所至。 (3)本检验法只能作为筛选或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X光检查。 3．室内质量控制： 每天用质量控制品进行同步检验一次，以确保试剂质量。 二、试带法 国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带，使用方便，患者也可自留标本检测。 三、邻甲联苯胺法 （一）检测原理 血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过氧化氢，放出新生态氧，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。 （二）试剂 1．10g／L邻甲联苯胺(o-tolidine)溶液： 取邻甲联苯胺1g，溶于冰醋酸及无水乙醇各50m1的混合液中，置棕色瓶中，保存于4℃冰箱中，可用8—12周，若变为暗色，应重新配制； 2．3％过氧化氢液 东莞常平医院 临床检验实验室 文件编号： DGCPH-CL-SOP-07-22 隐血试验版序：2005-1页