角膜上皮细胞的免疫学特性的论文.docVIP

　　角膜上皮细胞的免疫学特性的论文 【摘要】 目的：探讨角膜上皮细胞刺激淋巴细胞增生的能力和共同刺激通路分子在角膜上皮细胞的表达。方法：体外共同培养人角膜上皮细胞和外周血单个核细胞，免疫组织化学染色方法测定hla ⅱ类抗原、cd40、cd154、cd80和cd86的表达，同时对比角膜移植排斥反应的移植片。荧光辅助细胞筛选、分析、测定cd69的上调。结果：hla ⅱ类抗原在角膜上皮细胞表达，γ干扰素能够升高共同刺激通路分子cd40和cd80的表达；而且hla ⅱ类抗原和cd40均在角膜移植排斥反应的移植片上被检测出。t淋巴细胞在共同培养系统中被上皮细胞激活。结论：人角膜上皮细胞参与角膜移植排斥反应过程，移植免疫排斥反应被上皮细胞所诱导和初始化，但最终反应作用于内皮细胞。 【关键词】 抗原递呈细胞 角膜上皮细胞 外周血单个核细胞 共同刺激通路 　　the immunological character of corneal epithelial cells 　　burgeppendorf,university of hamburg,hamburg 20246,germany 　　［abstract］objective:to investigate the capability of corneal cells to stimulate lymphocyte proliferation and the expression of costimulatory molecules on primary human corneal epithelial cells.methods:human corneal epithelial cells ononuclear cells(pbmc). expression of hla class ⅱ antigens, cd40, cd154, cd80 and cd86 easured by immunohistochemical staining,and the expression of such molecules above on rejected corneal grafts phocytes ined by measuring upregulation of cd69 by facs analysis.results:hlaⅱ expression an primary corneal epithelial cells,and furthermore, upregualtion of costimulatory molecules cd40 and cd80 phocytes .conclusion:human corneal epithelial cells are involved in rejection process of the corneal transplantation. the immunological reaction is triggered by epithelial cells,and endothelial cells suffer as the targets. ［key ononuclear cells(pbmc)；costimulatory path1构成了第二信号。角膜移植实验模型研究证明，阻断cd80/86cd28和ctla4ig之间的反应延迟了免疫反应，ctla4ig结合抗cd154抗体或者可的松治疗进一步推迟了鼠类角膜移植排斥反应的启动［5］。排斥反应的组织学研究表明，淋巴细胞，单核细胞和巨噬细胞已经被确认为优势的免疫细胞，导致了角膜组织细胞与浸润的淋巴细胞之间的免疫反应参与角膜移植排斥反应机制的假想［6］。但是，角膜细胞导致t淋巴细胞增生的过程尚未明了。本实验中，我们假设在角膜移植排斥反应过程中，角膜上皮细胞同样作为抗原递呈细胞参与了免疫反应。 　　1 材料与方法 　　1.1 角膜上皮细胞的培养 　　角膜上皮细胞来自内皮细胞数量不足、不适于角膜移植术的人供体角膜，或角膜移植术的角巩膜环。细胞培养于0.5 ml的培养液ham’s f12/dmem(gibco invitrogen)，添加10%胎牛血清fcs(gibco invitrogen)，10 ng/ml鼠上皮生长因子(biochrom)，5 μg/ml牛胰岛素(sigma)，0.1 μg/ml霍乱毒素(sigma)，5 mg/l转铁蛋白(sigma)，0.18 mmol/l腺嘌呤(sigma)，0.4 mg/l水合可的松(sigma)，2 nmol/l三碘甲状腺氨酸(sigma)，4 mmol/l谷氨酸(biochrom)和抗生素［7，8］。每周更换2次培养液。