乳酸脱氢酶(LDH)总活性比色法定量检测试剂盒产品说明书....pdfVIP

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS50006 v.A GENMED 乳酸脱氢酶（LDH ）总活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 GENMED 乳酸脱氢酶（LDH ）总活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中还原型烟 酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH ）氧化后峰值的降低，即采用比色法来测定细胞萃取样品中酶活性的权威而 经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解样品 （动物、人体、植物、昆虫等）乳酸脱氢酶（LDH ）的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷， 性能稳定。 技术背景 乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶，催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。乳酸脱氢酶由4个亚单位构成，有两种 类型：肌肉型和心肌型。根据其亚单位成分，分为5种同功酶。乳酸脱氢酶的活性检测用来评价细胞或组织 的损害状况，基于还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide ；NADH ）转化 为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide ；NAD ）的变化（340nm 波长），来定 量测定乳酸脱氢酶的活性。乳酸脱氢酶反应系统为： 乳酸脱氢酶 + 丙酮酸+NADH ←⎯⎯⎯→乳酸+NAD （高吸收峰） （低吸收峰） 产品内容 GENMED 缓冲液（Reagent A ） 毫升 GENMED 反应液（Reagent B ） 毫升 GENMED 底色液（Reagent C ） 毫升 GENMED 阴性液（Reagent D ） 微升 产品说明书 1 份 保存方式 保存 GENMED 反应液（Reagent B ）和GENMED 底色液（Reagent C ）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃ 冰箱里，GENMED 底色液（Reagent C ）避免光照，有效保证12月 用户自备 1．5毫升离心管：用于反应液配制的容器 比色皿：用于比色的容器 分光光度仪：用于比色分析 酶标仪：用于微量样品比色分析 实验步骤 实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的 GENMED 反应液（Reagent B）和 GENMED 底色液（Reagent C） 1 置入冰槽里融化。GENMED 底色液（Reagent C）避免光照。然后进行下列操作。 一、 测定准备 1． 准备好待测样品（例如细胞裂解样品等），置于冰槽里 2． 设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长340nm，时延5秒，间隔30秒，读数6次（共 3分钟），并置 零或设置0分钟和1分钟各测读1次 二、 背景对照测定 3． 移取 微升 GENMED 缓冲液（Reagent A）到新的比色皿 4． 加入 微升 GENMED 阴性液（Reagent D） 5． 加入 微升 GENMED 反应液（Reagent B） 6． 上下倾倒数次，混匀 7． 在25℃温度下孵育5分钟 8． 放进分光光度仪，置零 9． 取出比色皿，加入 微升 GENMED 底色液（Reagent C） 10．上下倾倒数次，混匀（限定在 3 秒之内） 11．即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照（0分钟读数－1分钟读数），正常读数差值为0.001至0.005 三、 样品测定 12．移取 微升GENMED 缓冲液（Reagent A）到新的比色皿 13．加入20微升待测样品（2