唾液DNA提纯试剂盒说明(最终版).docVIP

PAGE  PAGE 5 PAGE 1 Just-a-Tube ?唾液DNA提纯试剂盒说明书 室温保存，RNase A 保存在4 oC。 试剂盒组成及贮存 Just-a-Tube ?唾液DNA提纯试剂盒可从Charm-Protect唾液收集和储存液中提纯gDNA，其组成如下表所示。所有的组分除了RNase A 需要保存在4 oC之外，其余组分室温保存即可。可进行50, 250 或者5次gDNA的提纯。 产品目录号Product Catalogue #QT-275-MQT-275-LQT-275-S纯化规模Purification Scale502505结合管（BT3） Binding Tube (BT3)502505结合缓冲液（KB6）Binding Buffer (KB6)10.0 ml50.0 ml1.0 ml洗涤液-1（WB1）Washing Buffer I (WB1)5.5 ml27.5 ml0.55 ml洗涤液-2（WB2） Washing Buffer II (WB2)18.0 ml90.0 ml1.8 ml洗脱缓冲液（EB2）Elution Buffer (EB2)5.5 ml27.5 ml0.55 mlRNA切酶A（RA2）RNase A (RA2) (20 mg/ml)1.1 ml1.1 ml × 50.11 ml 产品介绍 利用Just-a-Tube? 唾液DNA提纯试剂盒可以简单，迅速地从Charm-Protect唾液收集和储存瓶的唾液储存液中分离到高质量的DNA。DNA样品的纯化仅在一个小管中进行。在这个过程中不需要膜或磁珠结合来DNA。昌美生物科技有限公司将固体表面可逆结合技术（SSRB）应用到Just-a-Tube系统中，离心管底侧涂有可与唾液裂解液中DNA选择性高效结合的结合剂。在结合缓冲液作用下，结合剂可特异性结合gDNA，而蛋白和其它的成分保留在溶液中。未结合的物质经涮洗后予以去除。纯化的gDNA经10 mM Tris 洗脱液或去离子水洗脱。纯化的gDNA可直接用于下游反应，如限制性酶切反应，SNP分析，PCR，序列分析，全基因组扩增（WGA）和DNA甲基化分析等。 所需的额外材料 *96-100 %乙醇， *异丙醇， *1.5 ml 或2.0 ml离心管， *武汉昌美生物技术有限公司生产的唾液收集和保存瓶中的Charm-Protect唾液DNA保存液， *移液器和吸头， *可离1.5ml或2ml离心管的离心机, *涡旋振荡器, *水浴锅或恒温金属浴, 常规防范 1．该试剂盒仅用于实验。 2．实验操作时穿实验服，戴一次性手套和眼镜。避免摄取和吸入试剂，避免与试剂盒中试剂进行皮肤接触，一旦接触，用手彻底冲洗。 3．提纯核酸DNA时，避免核酸酶的污染，使用无菌新吸头避免交叉污染。 实验之前的准备工作 从唾液裂解液中提纯gDNA之前，需要根据提纯的样品数目制备新鲜的工作结合缓冲液。工作结合缓冲液由结合缓冲液（KB6）与100%异丙醇以1:4体积均匀混合得到，如配制500 μl 工作结合缓冲液：将100 μl 结合缓冲液（KB6） 与 400 μl异丙醇混合均匀。制备的工作结合缓冲液的体积根据： (1)待提纯的样品数目；(2) 预期的损失， 在悬浮过程中，一般会损失10% 。制备的工作结合缓冲液（KB6）, 每100 μl 细胞裂解液加100 μl含异丙醇的工作结合缓冲液（1:1比例）。剩余的结合缓冲液当天予以丢弃。 QT-275-M 试剂盒, 加22 ml 100 %乙醇到Washing Buffer I （WB1）中，充分混匀。 QT-275-L 试剂盒, 加110 ml 100 %乙醇到Washing Buffer I （WB1）,充分混匀。QT-275-S 试剂盒, 加2.2 ml 100 %乙醇到Washing Buffer I （WB1）,充分混匀。（在瓶上做好标记表示已加乙醇！）。室温保存，加乙醇的WB1在六个月之内使用。 QT-275-M试剂盒，加72 ml 100 % 乙醇到Washing Buffer II（WB2）中，充分混匀。 QT-875-L试剂盒，加360 ml 100 % 乙醇到Washing Buffer II （WB2），充分混匀。QT-875-S试剂盒，加7.2 ml 100 % 乙醇到Washing Buffer II （WB2），充分混匀。（在瓶上做好标记表示已加乙醇！）。室温保存，加乙醇的WB2在六个月之内使用。 该试剂盒可从100 μl直到1000 μl唾液保存液中提纯gDNA。如果有需要，4 ml 唾液保存液也可以在一次提纯过程中被提取。在进行gDNA