选修3[人教版)1.2基因工程操作基本步骤.docVIP

态度决定一切 山东省昌乐及第中学高二生物学案 NO.2 编制：高伟强 审核：王京礼 审批： 时间：2013.3.1 PAGE 6 PAGE 7 专题1 1.2 基因工程的基本操作程序 课前预习案 预习目标 简述基因工程原理及基本操作程序。 预习内容 1.基因工程的基本操作程序主要包括哪四个步骤？ 2.目的基因主要是指什么，也可以是什么？目前常用的获取目的基因的方法有哪三种？ 3.什么是基因文库？有哪几种？如何区分？ 4.从基因文库中获取目的基因的依据有哪些？（找出5条） 5.利用PCR技术扩增目的基因： （1）PCR的含义：一项在生物体外_____特定DNA片段的核酸合成技术。其原理是 。 （2）前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。 （3）过程：目的基因DNA受热变性后解链为 ， 与 相应互补序列结合，然后在 作用下进行延伸，形成DNA。 （4）方式：成______形式扩增（约为_____，其中n为扩增循环的次数）。 6.人工合成法：当基因较 ，核苷酸序列 时，可以通过DNA合成仪用化学方法直接 合成。7.基因工程的核心是什么？目的是什么？ 8.一个基因表达载体由什么组成？各有什么功能（作用）？ 9.什么是转化？ 10.将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是什么?除此之外，还有什么方法？ 11.转基因动物中采用最多，最为有效的将目的基因导入动物细胞的方法是什么？ 12.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用__ _处理细胞，使细胞处于一种____________ _____ 的生理状态，这种细胞称为__________。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与 细胞混合，在一定的温度下促进 细胞吸收DNA分子，完成转化过程。 13.目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是什么？检测方法是什么？ 14.检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是什么？检测方法是什么？ 15.检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是什么？除了上述分子检测外，有时还需要进行什么水平的鉴定？ 三、预习自测 1.下列有关基因工程操作顺序的组合中，正确的一组是（ ） ①目的基因的检测与表达 ②???的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞 ④目的基因的提取 A、①②③④ B、④③②① C、④②③① D、③④②① 2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是 ( ) A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少 D．只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达 3.下列属于获取目的基因的方法的是 ( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A．①②③⑤ B．①②⑤⑥ C．①②③④ D．①②④⑥ 四、提出疑惑 同学们，通过你的自主学习，你还有哪些疑惑？ 课内探究案 学习目标及重难点： 1、简述基因工程原理及基本操作程序。 2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。 学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。 学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。 学习过程 （一）目的基因的获取 1.PCR技术与DNA复制有何异同 比较项目DNA复制PCR技术不同点场所酶引物温度相同点2.如何区分不同的基因文库？（见课本第10页表格） （二）基因表达载体的构建 1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？ 2.基因表达载体的构建需要哪些工具酶？ 3.将目的基因与运载体混合并用DNA连接酶处理后，会出现几种结果？ （三）将目的基因导入受体细胞 1.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理，你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗？若想将一个抗病基因导入单子叶植物，你应该如何做？ 2.比较将目的基因导入受体细胞的方法? 生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法受体细胞转化过程 （四）目的基因的检测与鉴定 1.为什么要有“目的基因检测与鉴定”这一步？ 2.分子检测过程中，有哪几种杂交带？各说明什么问题？ 反思总结 基因工程的基本操作步骤主要方法、技