应用RTPCR技术检测GFLV的研究.pdfVIP

应用?—??际跫觳釭??难芯?竺雪雪堇主耋耋：坦主娄王室鹜銮塞：：???峁?胩致?牛建新鲁晓燕??．?菩弁?昊泼?ê锾遥?荒昕;ǘ?危?峁?淮危?耗┫那锟R淮位ú⒔峁??跚镉???．??鲜红果肉猕猴桃：果长椭圆形，果重?—???墒炱?月底。果纵剖后，果顶、果??幼哟笱?┭г涸傲窒凳?幼??????云南猕猴桃独有种垂直分布垂直分布海拔高度：以?????间。集中???内。??待定名的种类开花一次。??．?烊饫嘈汀???全果紫色．当果肉软化后．果皮、果肉紫红，产地称为血藤，作外伤药物。蒂两端果肉鲜红、鲜红部分占总量的??—??口感香甜，品质上乘。??胎座周围果肉粉红色：果?一???墒炱?月中旬至?月中旬。??．?ɑ?汀???矮生种：植株矮小，枝叶紧凑，主干粗短，可供作矮化材料与株作武裁培用砧木。??．??关矮化种：枝条节间短，与一般美味、中华猕猴桃栽培种比较，节间长度为栽培品种的??～??。??原产于云南的猕猴桃属植物?个种、?个变种、?霰湫停?涫?糠直鹫既ü??鲋?的?．?ィ??霰渲值???％，?霰湫偷???％，种类之多，居全国之首。??全国在??年为止，发现三个?含量极高的种，在??鲜果果肉内?含量，阔叶猕猴桃??????缓尤这ê锾???????幻ɑㄢê锾??．????甇?，云南本次调查中都有发现。云南省猕猴桃属植物共有?个种，含云南独有种】?觯?渲?个，又?龇掷嗳鹤槟?的种都有生长，以及待定名的红肉型、矮化型、雌雄同株特色性状种类。??原产于云南的猕猴桃属种类．有我国北方的种和南方的种，既有该属古老种和经强烈演化、演变的变种、变型。就此状况讲，云南是该属种类发展演化的主要地域之一。??云南气候复杂和多样，生态环境复杂，故该属种类分布最多、面广，多数地州气候宜于各种类生长发育，可供利用的种不少，尚潜藏着开发的巨大船量与价值。许多各类有特殊利用价值。为此，有必要完善建立该属植物各类资源圃，将利于今后综合利用开发资源，保护资源供持续发展开发应用．以市场为导向，从事效益开发，发高科技对特色各类基因的应用。保健药物的应用都具有长远与现实意义。?????摘要葡萄扇叶病毒是危害葡萄的主要病毒之一，世界各地均有分布。该研究以扇叶病 牧虾头椒?本试验通过研究影响?—??┰龅囊蛩兀??⒘艘宰躌?为模板的??的?—??募觳馓逑担?蟠筇岣吡斯?鞑《镜募觳饬槊舳取８眉际跤τ糜诠?鞑《炯觳猓?小?测??的研究???样品浓度用分光光度计测定。在???和?叽?直鸲脸龉饷?栽培无病毒苗木是防治果树病毒病的有效途径之一，而病毒检测水平的高低直接影响无病毒苗的推广。在传统检测技术方面国内外均已做了大量研究，也取得了一定进展。不过传统的检测方法灵敏度低，周期长，且受季节的限制。随着分子生物学的不断发展，分子检测技术也开始在果树病毒检测中应用，?世纪?年代以来，美、欧、日等发达国家已开始了利用??际跹芯抗?鞑《镜募觳夤ぷ鳎?⑷〉昧撕芎玫男Ч??夜?谡夥矫嬖蚬懈掌?步。利于我国果树无病毒苗的推广和检疫工作的开展。??供试材料??．?躌?和?—??逑到?⒕?檬?幼哟笱г傲窒倒?魇笛檎疽阎4?纫恫?毒的葡萄病株．无病毒的实生苗为对照。田问样品的?—??熹?婊?杉?试雌院蜕??闷咸言暗钠咸岩镀??薏《?的实生苗为对照。??实验方法??．?躌?提取方法试剂和操作步骤详见鲁晓燕硕士论文《应用????际跫?度，???放ǘ任#篛?竫核酸稀释倍数×?／???慌ǘ鹊ノ晃猵∥?。若样品??????比值小于???悸怯梅樱?确鲁樘帷５缬静捎?．?サ那碇?悄?海琁??妊?进行电泳，当澳酚蓝前沿迁移到胶的三分之二处时，停止电泳，取下胶块于紫外灯下观察记录．并用数码照相机照相。????猑一??疕???，测定范围为??????口，购自华美生物工程公司。?—??从μ逑档慕?ⅰ??—??从κ约良耙瞧鳌???????醋B济?、??、?购自宝生物工程?罅?有限公司，双蒸水、?慧匣?掖迹??镉苫C拦?竞铣伞Ｆ溆嗍约辆?为国产分析纯。??俏C拦鶬????．??引物设计。??的引物设计参考?瓻?????瓵?????攴?表的引物序列，由华美公司台成，引物为干粉，?值均为??具体序列为：?瓹???????????长度为??株为材料．根据病毒辅码外先蛋白的棱苷畦序刊，设计特异引精????，??????．建立了以??D４榈腉??腞?狿?桂酒体幕。???榈珩灯状?飨裕?朐て?曲引曲应扩增????瓮昕?呛稀２⒗?媒?⑵鹄辞?际跆逑担?蕴镂什芴呀?辛怂婊?⊙?检测，取得了?艉眯Ч?Ｓ捎诖朔椒ū?写樽饕械ィ?觳庵芷诙蹋?既肥赂叩戎疃嘤诺悖?又??有广迂和更进一步的应用侪值，日而具有鞍商的理论价值和广迂的实践意义。关■词昔曹扇叶摘毒?—????焖???．???．?????、?????????????? 峁?敕治???????、???