南京大学 分子生物学 课件 第19讲.ppt

（三） ?噬菌体的阻遏蛋白及其作用 1，Cro蛋白 （1）与操作子结合的亲和力 （2）功能;2，CI蛋白 （1）与操作子结合的亲和力 （2）功能 （3）cI基因的突变效应;（四） CII蛋白和CIII蛋白 1，CII蛋白 （1）CII蛋白的特点 A，以寡聚体形式起作用 B，促进启动子PE、PI和PaQ的转录 （2）CII蛋白调控的启动子的特点;2，CIII蛋白 3， ?噬菌体cII、cIII基因突变效应;（五）抗终止因子及其作用（P206） 1，N蛋白 （1）作用位点（图6-17） （2）作用机制;2，Q蛋白 （1）作用位点 （2）作用;（五） ?噬菌体溶原生长的基因表达调控 ?噬菌体的溶原生长分三个阶段 1，溶原化的建立 （1）早期基因的表达;（2）营养耗竭的影响 A，对寄主的影响 B，对CII蛋白的影响;（3）MOI值过高的影响 A，MOI值 B， MOI值过高（MOI≥10）对CII蛋白的影响 C，从PE转录CⅠ基因体制的建立;2，溶原化的维持 （1）PE体制向PM体制的转换 （2）溶原化的维持;3， ?原噬菌体的释放 （1）当溶原细菌受到紫外线等作用引起DNA损伤时RecA切断CI蛋白单体，失去阻遏活性 （2）早期操纵元转录;（六）?噬菌体溶菌生长的基因表达调控 1，感染细菌立即进入溶菌生长的基因表达调控 （1）早期基因的表达调控 （2）晚期基因的表达调;2，从溶原化状态进入溶菌生长的基因表达调控 （1）早期基因的表达调控 （2）晚期基因的表达调控;第六节 基因转录的翻译调控——衰减子系统;一、概述 1，阻遏蛋白调控系统对trp酶系统转录活性的影响 2，衰减子系统对trp酶系统活性的影响 3，衰减子系统存在的意义;;（二）衰减子的作用机制 1，trp mRNA前导序列的二级结构（图8－24） 2， trp mRNA前导序列转录与翻译的时空关系;3，Trp对衰减子作用的影响（图8－25） （1）Trp存在时（图8－25，a） 核糖体可以完成前导肽的翻译，到达终止密码，占据序列1和部分序列2 序列3、4配对，终止子结构形成， trp mRNA转录终止;（2）Trp（或Arg）饥饿时（图8－25，b） 核糖体停顿在Trp密码子上，占据序列1，此时序列4尚未转录出来 序列2、3配对，终止子结构不能形成， trp mRNA转录继续;（3）其他Aa（如Gly）饥饿时（图8－25，c） 序列1、2配对??序列3、4配对，终止子结构形成， trp mRNA转录终止;4，Trp衰减子模型的实验证据 降低Trp衰减子转录终止作用的突变降低Trp酶系统的表达，反之则增强Trp酶系统的表达;三、衰减子的普遍性及其生物学意义 1，普遍性 （1）结构共性 ORF，终止子序列，相应Aa的密码子，可能存在的的二极结构;（2）作用机制共性 前导肽翻译作用不存在时，转录在衰减子处终止 2，衰减子的作用机制可被看作是一种可阻遏的正调控 激活物：核糖体 辅阻遏物：相应的氨酰基-tRNA;3，衰减子调控的生物学意义 （1）调控更为灵敏 （2）对代谢产物的反应更为直接 （3）调控更为精细;四、负责核苷酸合成的基因的衰减子 （一）天门冬氨酸转氨甲酰酶操纵元（pyr BI操纵元）前导序列结构 1，长度 160个核苷酸 2，ORF 从21位开始，编码44个Aa的前导肽;3，暂停位点 由位于60位核苷酸附近的发夹结构和第85位核苷酸附近的一串U组成 4，不依赖于ρ因子的终止子 在第120个核苷酸附近 5，前导肽的终止密码子 位于终止子下游25个核苷酸处;（二）pyr BI操纵元衰减子作用的机制（图8－26） 1， UTP含量较低时 RNA聚合酶在暂停位点的一连串U处发生较长时间的停顿;核糖体追赶上RNA聚合酶，与之发生作用，结束RNA聚合酶的延宕 耦联核糖体的RNA聚合酶继续转录，到达终止子结构时不发生终止作用，pyrB、I基因得以转录;2，UTP充足时 RNA聚合酶在暂停位点不发生长时间的延宕 核糖体不能追赶上RNA聚合酶 RNA聚合酶继续转录，到达终止子结构时发生转录终止作用，pyrB、I基因不能转录;第七节 翻译水平的调控;3，反义RNA的作用方式 （1）与mRNA的核糖体结合位点结合，使翻译不能起始 （2）与mRNA结合形成双链结构，成为核酸内切酶的底物，从而使mRNA不稳定 （3）与转录物结合，使转录提前终止 ;（二）大肠杆菌外膜蛋白基因表达中micRNA的作用 1，渗透压对ompC，ompF基因表达的影响 （1）高渗 OmpC合成增多，OmpF合成受控制 （2）低渗 OmpF合成增多，OmpC合成受控制;2，micF RNA对ompF基因表达的调控 （1）micF RNA 模板位置：位于ompC启动子上游 转录：ompC转录时， micF RNA转录 m