第二章 载体-1-1是.ppt

*第二章 基因工程载体系统Ev;*基因工程（gene engi;*目的基因克隆载体工具酶受体系;* ;*克隆载体具备的特性1.能在宿;*按来源分:质粒载体、噬菌体载;*一、什么是质粒、质粒的特点二;* 质粒是存在于宿主细胞中的一;*细菌质粒是闭合、环形的双链D;*3.质粒DNA分子构型具有三;*Evaluation onl;*Electrophoresi;*4. 质粒大小和拷贝数质粒大;*500-70010-151-;*5. 质粒的分类5.1 按能;*1) 严紧型复制： (str;*松弛型质粒DNA的复制不受宿;*二、质粒的一般生物学特性Ev;*1.自主复制性a、 复制由复;*质粒的复制子 （ori ）决;*2. 不相容性(Incomp;*Evaluation onl;*3.携带特殊的遗传标记四环素;***抗药性标记选择Evalu;* 插入失活(insertio;*3-2. 蓝白斑选择原理：1;*?-半乳糖苷酶(LacZ)能;* P LacZ α ;*2）受体菌lacZ突变（la;*pUC质粒载体具有一段称为L;*4）?互补的插入失活 ;*5) IPTG的诱导作用IP;*Evaluation onl;*蓝色菌落条件：LacZ ???;*通过看培养皿上菌斑颜色就能知;*无质粒的受体菌?-半乳糖苷酶;*Evaluation onl;*三、天然质粒的局限性多数分子;*四、质粒载体必备条件复制起点;*pSP21241. pBR3;双抗菌素抗性选择标记：没有获得;*筛选重组子示意图（负筛选）插;*2. pUC系列Univer;*Evaluation onl;*利用菌落颜色筛选重组子Eva;*3. pGEM载体pGEM-;*① 如果加入纯化的T7或SP;改建质粒的要求尽可能是质粒缩小