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A10本_周氏(Bence_Jones)蛋白定性检查操作规程
A10 尿本-周氏(Bence-Jones)蛋白定性检查操作规程
A10.1首页
本-周氏蛋白定性检查操作规程(手工操作)
A10.2 检测原理
本-周氏蛋白(Bence-Jones)又称凝溶蛋白,是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。此种蛋白在一定的pH条件下加热至40~60℃时发生沉淀,温度升高至100℃时,沉淀消失,再冷却时又可重现沉淀。
A10.3标本采集
用一干燥和清洁的容器收集新鲜透明尿液4 ml于试管中。样本的存放时间不可超过4小时。
A10.4试剂
200 g/L 磺基水杨酸溶液。
2 mol/L 乙酸盐缓冲液(pH 4.9±0.1):取乙酸钠(CH3COONa·3H2O)17.5 g加冰乙酸4.1ml,再加蒸馏水100 ml,调pH至4.9。
A10.5操作
A10.5.1先将尿液用磺基水杨酸作蛋白定性检查,如呈阴性反应,则可认为尿液标本中本-周氏蛋白阴性。
A10.5.2取透明尿液4 ml于试管中,再加入乙酸盐缓冲液1 ml,混匀后,放置56℃水浴中15 min。如有混浊或出现沉淀,再将试管放入沸水中,煮沸3 min,观察试管中混浊或沉淀的变化,如混浊变清、混浊减弱或沉淀减少,均提示本-周氏蛋白阳性。若煮沸后,混浊增加或沉淀增多,表明此尿液中还有其它蛋白质,此时应将试管从沸水中取出,立即过滤。如滤液开始透明,温度下降后浑浊,再煮沸时又透明,提示本-周氏蛋白为阳性。
A10.6注意事项
A10.6.1尿液应新鲜,否则因白蛋白、球蛋白分解变性而干扰试验。
A10.6.2混浊尿不能用,应离心沉淀,取用上清尿液作试验。
A10.6.3过多的本-周氏蛋白,在90℃以上不易完全溶解,故需与对照管比较,也可将尿液稀释后再测。
A10.6.4煮沸过滤除去尿中白、球蛋白时,动作要迅速,并需保持高温,否则
本-周氏蛋白也会滤去。
A10.6.5甲基苯磺酸法比热沉淀反应法灵敏度高,但有假阳性。
A10.7临床意义
A10.6.1一般认为,当浆细胞恶性增殖时,可能有过多的轻链产生或重链的合成被抑制,致使过多的轻链通过尿液排出。
A10.6.2约50%的多发性骨髓瘤患者及约15%的巨球蛋白血症患者,其尿液可出现本-周氏蛋白。
A10.6.3肾淀粉样变、慢性肾盂肾炎及恶性淋巴瘤患者等,亦可出现本周氏蛋白。
A10.8参考文献
1.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程(第三版).南京:??南大学出版社,2006,281-282.
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