大白栓菌的人工培养条件优化.docVIP

　　大白栓菌的人工培养条件优化 作者：谭梦华 段朝红 桂裕成 向江涛 叶建武 张亚雄 汪鋆植 【摘要】 　　目的探讨大白栓菌的人工大规模培养条件。方法采用正交实验设计筛选大白栓菌的固体及液体培养条件。结果固体培养基的最佳配方为栗木屑含量70 g，玉米粉含量35 g，石膏含量2 g，白糖含量1 g；大白栓菌液体培养的最佳条件是玉米粉4.2 g/100 ml, 栗木汁5.0 g/100 ml,溶氧条件为静置培养。结论大白栓菌可以采用人工大规模培养,为进一步开发利用创造了条件。 【关键词】 大白栓菌 人工培养 配方 　　Abstract:ObjectiveTo investigate the artificial rearing condition of Trametes lactinea (Berk.)Pat. MethodThe orthogonal design ula of the solid culture medium ula of the liquid culture medium have been ascertained to be corn flour 4.2 g/100ml , castanea spp juice 5 g/100ml, dissolve for oxygen condition static culture, not bEing put into rocking bed. ConclusionThe artificial rearing condition is applicable to the large-scale culture of Trametes lactinea (Berk.)Pat, e conditions for further development. 　　Key etes lactinea (Berk.)Pat.； Artificial rearing； Formula 　　大白栓菌Trametes lactinea (Berk.)Pat.为多孔菌科真菌，担子果一年生，无柄，木栓质。它生于活叶树木材上，分布于 中国 、马来西亚、印度尼西亚、菲律宾、巴基斯坦、印度、斯里兰卡、澳大利亚等国家［1］。 　　大白栓菌作为天麻等兰科植物种子萌发菌，具有一定的 经济 价值［2］。但大白栓菌野生资源较少，不能满足其开发利用的需要。因此本实验对大白栓菌的人工培养进行了研究。 　　 1 材料与仪器 　　1.1 材料 　　玉米粉、石膏、白糖、栗木屑、琼脂、95%酒精(天津科密欧化学试剂、无水乙醇(武汉中南化工试剂有限公、氯仿（上海宏申化工、醋酸乙酯（天津市东丽区天大化学试剂、薄层板及硅胶（青岛海洋化工有限公、柱层析硅胶200-300目（青岛海洋化工厂分。大白栓菌由湖北三峡科技学校提供，经王绍柏老师鉴定为大白栓菌（Trametes lactinea (Berk.) Pat.）。 　　1.2 仪器 　　旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂RE-52AA）、恒温振荡器（国华 企业 CHA-S）、生化培养箱(广东省医疗器械厂LRH-280)、Centrifuge 5810R冷冻离心机、DZF-6020型真空干燥箱等。 　　 2 方法与结果 　　2.1 菌种的纯化(涂布分离法) ［3］ 　　2.1.1 培养基配制先将栗木屑用水加热提取得栗木汁，将玉米粉、石膏、白糖以一定比例混匀，然后加入栗木汁，再加入2%琼脂,用玻棒搅拌均匀后加热至沸, 0.1～0.15MPa蒸气高压灭菌30 min。 　　2.1.2 平板的制作及接种各培养皿趁热倒入5 ml培养基，冷却后即得平板，于无菌操作台上进行接种，将菌丝放到75%酒精中冲洗，然后剪碎放入装有无菌水的小三角瓶中，充分摇匀制成孢子悬浮液后涂布到平板上。 　　2.1.3 菌体培养置28℃恒温培养箱中培养120 h。培养皿中分别长出了2～4个菌落，通过 电子 显微镜镜检，确定了大白栓菌。 　　2.2 菌种的斜面保藏 　　2.2.1 试管斜面制备使用φ15×100玻璃试管，趁热倒入2ml培养基，包扎平放，冷却后即成斜面。 　　2.2.2 接种与培养将2.1培养皿中的各个菌落于无菌操作台上分别接种到试管中，28℃恒温培养72 h。 　　2.2.3 保藏挑选上述生长良好的试管斜面菌种于冰箱中冷冻保藏。 　　2.3 大白栓菌的固体培养 　　2.3.1 培养基的确定用松木屑、玉米芯屑、杂木屑、栗木屑作为培养基进行实验，发现栗木屑的培养效果最佳。但只用栗木木屑作为培养基，由于其营养成分不能很好地满足大白栓菌的生长，虽然能生长，但其生长周