乌拉甘草有效成分对人体４ 种肿瘤细胞增殖与凋亡的影响.docVIP

　　乌拉甘草有效成分对人体４ 种肿瘤细胞增殖与凋亡的影响 作者：马淼 周旭莉 户元林 肖辉 李学禹 【摘要】 　　目的测定乌拉甘草提取物对人体４ 种肿瘤细胞的抑制效果。方法应用ＭＴＴ 法测定甘草水提物（甘草酸）与醇提物（总黄酮）对宫颈癌细胞株（Ｈｅｌａ）、乳腺癌细胞株（Ｂｃａｐ －３７）、胃癌细胞株（ＭＧＣ －８０３）以及肝癌细胞株（Ｂｅｌ －７４０４）增殖的抑制作用；运用Ｈｏｃｈｅｓｔ ３３２５８ 荧光染色剂测试其诱导细胞凋亡的生物学效应。结果甘草酸的抑瘤效果表现出浓度依赖性，与浓度呈正相关关系。高浓度甘草酸（１ ０００ μｇ／ｍｌ）对Ｂｃａｐ －３７，Ｈｅｌａ，ＭＧＣ －８０３ 的增殖均有较强的抑制作用，其抑制率分别为７６．３７％，７９．７１％，７１．０６％，对Ｂｅｌ －７４０４ 细胞增殖的抑制作用较差，抑制率仅为２４．２９％。在一定浓度范围内（２００ ～１ ０００ μｇ／ｍｌ），其对４ 种肿瘤细胞增殖的抑制率与样本浓度大小呈负相关关系，２００ μｇ／ｍｌ 剂量的甘草黄酮抑制肿瘤细胞增殖的效果最佳，其对Ｂｃａｐ －３７，Ｈｅｌａ，Ｂｅｌ －７４０４，ＭＧＣ －８０３ 等４ 种肿瘤细胞增殖的抑制率分别为７９．５５％，７９．９８％，６７．９１％以及３７．８６％。甘草酸、甘草黄酮均能有效诱导这４ 种肿瘤细胞发生凋亡。结论甘草酸和甘草黄酮诱导细胞凋亡是其显著抑制肿瘤细胞增殖的重要途径。 【关键词】 乌拉甘草 甘草酸 酮 抗肿瘤 细胞凋亡 　　Abstract:ObjectiveＡｎｔｉ －ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｈｉｎ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Glycyrrhiza uralensis Ｆｉｓｃｈ ｏｎ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ （ｃｅｒｖｉｘ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ：Ｈｅｌａ， ｂｒｅａｓｔ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ：Ｂｃａｐ －３７， ｓｔｏｍａｃｈ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ：ＭＧＣ －８０３ ａｎｄ ｈｅｐａｔｏｍａ ｃｅｌｌ：Ｂｅｌ －７４０４） ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．MethodsＭＴＴ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｎｔｉ －ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ， ａｎｄ Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３２５８ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｔｅｓｔ ｔｈｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ －ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ．ResultsＩｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ａｎｔｉ －ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ ｗａｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ， ｈｉｇｈｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ （１ ０００ μｇ／ｍｌ） ｈａｄ ｏｂｖｉｏｕｓ ａｎｔｉ －ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔ， ｗｉｔｈｉｎ ｃｅｒｔａｉｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ （２００ ～１ ０００ μｇ／ｍｌ）， ｉｎｈｉｂｉｔｏry ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｗａｓ ａｌｓｏ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ， ｔｈｅ ｌｏｗｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ （２００ μｇ／ｍｌ） ｗａｓ ｏｆ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏry ｅｆｆｅｃｔ， ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｒａｔｅｓ ｏｎ Ｂｃａｐ －３７， Ｈｅｌａ， Ｂｅｌ －７４０４，ＭＧＣ －８０３ ｗｅｒｅ ７９．５５％，７９．９８％，６７．９１％ ａｎｄ ３７．８６％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ConclusionＢｏｔｈ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎ ａｎｄ ｔｏｔａｌ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｈａｖｅ ｓｔｒｏｎｇｅｒ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ －ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌｓ． 　　Key . 　　１．４．2 体外抗肿瘤实验体外抗肿瘤实验分５ 个浓度（１００ ～１ ０００ μｇ／ｍｌ） 、阴性对照（含同一细胞密度的培养液）、空白对照。对数生长期细胞（细胞密度为２ ×１０５ 个／ｍｌ） １００ μｌ／孔接种于９６ 孔板，３７℃饱和湿度，５％ ＣＯ２ 条件下培养６ ｈ，待细胞均已贴壁，加入１００ μｌ 不同浓度的受试物，各设５ 个复孔。在４８ ｈ取出９６ 孔板，倒置显微镜下观察后，每孔加ＭＴＴ 溶液（５ ｍｇ／ｍｌ）２０ μｌ ，３７℃继续孵育４ ｈ，终止培养。小心吸弃孔内培养上清液。每孔加入１５０ μｌ ＤＭＳＯ，振荡１０ ｍｉｎ，在酶联免疫检测仪上测定各孔光吸收OD 值（A ＝５７０ ｎｍ），记录结果。 　　抑制率（％） ＝（