人参总皂苷和小檗碱对肺癌PG细胞分泌免疫抑制性细胞因子的影响.docVIP

　　人参总皂苷和小檗碱对肺癌PG细胞分泌免疫抑制性细胞因子的影响 作者：郝钰, 王萍, 吴珺, 邱全瑛 【摘要】 目的：观察人参总皂苷（ginsenoside, Gs）和小檗碱（berberine, Ber）对肿瘤细胞分泌免疫抑制性细胞因子转化生长因子β1（transforming grol）组、Ber（10 μg/ml）组、空白对照组和Jurkat组。用Gs和Ber作用PG细胞24 h后与Jurkat细胞共培养，24 h后倒置显微镜下观察Jurkat细胞生长的状态；台盼蓝拒染实验计数共培养6 h和24 h后Jurkat活细胞数；流式细胞仪检测共培养24 h后Jurkat细胞的凋亡率；100、50、25 μg/ml的Gs和10、5、2.5 μg/ml的Ber分别处理PG细胞，并设空白对照组（PG细胞未经药物处理），酶联免疫吸附测定法和放射免疫法检测PG细胞上清液TGFβ1和PGE2的含量。结果：Jurkat细胞与Gs和Ber处理过的PG细胞共培养后，其数目较空白对照组明显减少，而凋亡率较空白对照组明显增加；Gs和Ber可以增加PG细胞TGFβ1的分泌，对PGE2的分泌无影响。结论：Gs和Ber可以增强PG细胞导致的Jurkat细胞生长抑制和凋亡，其机制可能与Gs和Ber增加PG细胞分泌TGFβ1有关。 【关键词】 人参皂苷类; 小檗碱; 抑制因子, 免疫; 转化生长因子β1; 前列腺素E类 　　Objective: To observe the effects of ginsenoside (Gs) and berberine (Ber), tedicine, on transforming gro of human lung carcinoma cell line PG and human T lymphocyte cell line Jurkat l) and Ber (10 μg/ml) for ticroscope. The viable count of Jurkat cells etry. PG cells l Gs and 10, 5, 2.5 μg/ml Ber respectively, and the content of TGFβ1 and PGE2 in PG cells elinked immunosorbent assay (ELISA) and radioimmunoassay (RIA) method. 　　Results: After coculture ber of Jurkat cells ote the secretion of TGFβ1 in PG cells, but could not change the level of PGE2. 　　Conclusion: Gs and Ber can promote the groay be related to the upregulation of Gs and Ber on TGFβ1 secretion in PG cells. 　　Keymunologic; transforming groajor histopability plex, MHC）I类分子的缺乏、共刺激分子B7的缺陷、Fas分子下调耐受凋亡以及“Fas反击”和分泌免疫抑制性细胞因子等，使肿瘤不能有效地被免疫细胞识别和攻击，甚至主动下调宿主免疫功能，从而逃避抗肿瘤免疫反应。我们的前期研究结果表明，Jurkat细胞与PG细胞共培养后数目减少，人参总皂苷（ginsenoside, Gs）和小檗碱（berberine, Ber）可以促进PG细胞的这种作用，该结果可能与Gs和Ber增加PG细胞的FasL表达，促进PG细胞诱导Jurkat细胞凋亡的“Fas反击”作用有关。但Jurkat细胞与PG细胞共培养后数目减少的原因除与“Fas反击”诱导的凋亡有关外，也有可能与PG细胞分泌某些免疫抑制性细胞因子相关。本研究检测了PG细胞分泌转化生长因子β1（transforming grol，Ber 10 μg/ml。Gs、Ber分别处理PG细胞24 h，PBS缓冲液洗涤3次以洗去药液，消化离心后调整细胞浓度至2×105/ml，接种于25 cm2培养瓶，同时设立未经药物处理的对照组（空白对照组）。待细胞贴壁后（融合至80％左右），各组弃去培养液，各加入浓度为3×105/ml的Jurkat细胞悬液10 ml铺于PG细胞之上进行共培养。实验共培养组分为3组：Gs组、Ber组和空白对照组，同时设立Jurkat细胞单独培养组（Jurkat组）。以上4组每组设3个样本。100、50、25 μg/ml的Gs和10、5、2.5 μg/ml的Ber分别处理PG细胞24