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PCR实验检测标准操作规范 PCR检测实验室操作规范 一、PCR 实验室的设置及管理 1．目的：建立实验室的合理设置和科学管理，防止实验污染，保证检测结果的可靠性。 2．适用范围：本程序适用于分子诊断室的设置、工作流程和日常管理等。 3．负责人： 4．细则： 4．1流感实验室为急传所的专业实验室，从事临床标本的基因扩增检测及相关科研工作等。 4．2 本实验室采用实时荧光定量（定性）PCR 技术作为病毒基因诊断的主要手段，实验室分为三个区：试剂准备区（第一区）、标本处理区（第二区）、扩增分析区（第三区）。每一工作区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识。标本的接收则在检验科标本接收处进行。 4．3 各工作区专用的仪器设备、办公用品、工作服、实验耗材和清洁用具等，不可混用。 4．4 各工作区配置、功能和内务管理见各相关SOP 文件。 4．5 严格遵守从“试剂准备区→标本处理区→扩增分析区”的单一流向制度，不得逆向进入前一工作区。 4．6 非本实验室工作人员，未经许可不得入内；进修、实习或其他科室人员因科研活动需要，进入实验区域（试剂准备区、标本处理区、扩增分析区） 需首先熟悉本程序的各项规定并严格遵守执行，在本实验室人员监督指导下进行。 4．7 实验完毕后做好清洁消毒工作。 二、PCR 实验室工作制度 1．目的 ：保持良好的工作环境，以确保检测结果的可靠性，防止交叉污染，防止差错、事故及纠纷的发生。 2．适用范围：所有本实验室人员。 3．负责人： 4．细则： 4．1 本实验室进行临床基因扩增检测及相关实验工作，不得进行其它实验操作。 4．2 各区的用品不得混用。 4．3 在各区的实验操作过程中，操作者必须戴手套和帽子，严格按照操作规程。 4．4 试剂准备区只能进行试剂的贮存及配制等相关操作（见相关SOP 文件）。 4．5 标本处理区只能进行临床标本的保存，核酸提取、保存及其加入至扩增反应管和测定RNA 时cDNA 的合成（见相关SOP 文件）。 4．6 扩增分析区只能进行DNA 或cDNA 的扩增、实时荧光PCR 扩增产物的分析（见相关SOP 文件）。 4．7 进行实验时严格执行本实验室的各项操作规程，及时做好各种操作记录，力求准确、可靠。实验完毕，做好清洁、整理及分析统计等工作。 4．8 室内仪器由专人负责，未经许可，不得随意使用或挪用；爱护使用仪器，定期进行保养与维修。 4．9 爱护科室财产，注意安全；离开实验室前应关好门窗，检查水、电等。 三、PCR 实验室内务管理制度 1．目的：保证实验室日常内务管理及清洁工作顺利进行。 2．适用范围：实验室相关人员及相关清洁工人。 3．负责人： 4．细则： 4．1 非本室工作人员未经允许不得进入实验室。 4．2 各区的用品不得混用。 4．3 实验人员要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。 4．4 进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。 4．5 所有仪器（如PCR 扩增仪）须有专人负责，并有使用维护记录；实验人员必须熟悉仪器性能后方允许操作，并严格遵守操作规程。 4．6 所有试剂进购、配制、质检、使用均要有记录，未经允许不得随意带出本实验室。 4．7 每天了解仪器运转情况及试剂使用情况，确保仪器整洁安全，试剂合格使用。 4．8 各区的各种清洁消毒均应有记录，工作衣消毒时注意各区应分开进行处理。 4．9 注意保持实验室卫生整洁，严禁在室内抽烟、吃零食，非实验操作人员应尽量少入。 4. 10下班前检查门、窗、水、电，节假日应指定人员负责检查实验室的仪器、设备。 四、PCR 实验室人员的配置及管理 1．目的：保证实验室有足够数量的合格的具备开展该类实验能力的实验人员。 2．适用范围：适用于实验室人员配置、管理、培训及考核。 3．负责人： 4．细则： 4．1 人员要求 4．1．1 本实验室工作人员应为医学检验专业或相关专业毕业，具有中级以上技术职称或专科以上学历。 4．1．2 实验室工作人员应参加卫生部或省临检中心举办的PCR 技术培训，并取得合格证。 4．1．3 对于新进入本室的人员，如尚未取得PCR 技术培训合格证，应在实验室有培训合格证的上级技术人员的指导下进行实验工作，实验报告由有资格人员出具，并应在最短