健脾活血方对2型糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响.docVIP

　　健脾活血方对2型糖尿病大鼠肝细胞膜胰岛素受体的影响 【摘要】 　　目的探讨健脾活血方对2型糖尿病胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)大鼠肝细胞膜胰岛素受体（Insulin Receptor,InsR）mRNA表达的改善作用及机理。方法取ellitus rats and its mechanism.Methods60 DF-U50V型）中保存备用。整个实验过程中，模型组大鼠死亡2只，中药低剂量组大鼠死亡1只。 　　2.2 检测指标及方法 　　2.2.1 空腹血糖（FBG）测定给药前及给药2周后，大鼠禁食12 h，断尾采血。用血糖仪测定血糖。 　　2.2.2 空腹胰岛素（Fins）测定给药前及给药2周后，大鼠禁食12 h，眼眶静脉丛取血5 ml，用LG-10A 离心机37℃恒温离心（2 500 r/min,10 min）15 min，取血清，采用放射免疫双抗体法测定。 　　2.2.3 胰岛素敏感性指数（ISI）ISI=Ln［1/（FINS×FBG）］［8］ 　　2.2.4 肝细胞膜 InsR mRNA的表达RT-PCR法检测。 　　2.2.5 统计方法数值以±s表示，用STATA 7.0软件 计算 。P﹤0.01，P﹤0.05为差异具有显著性。 　 　3 结果 　　3.1 对大鼠FBG，Fins，ISI的影响结果显示，造模后，各组大鼠FBG、Fins显著升高，ISI显著下降，与空白组相比，有显著性差异(Plt;0.01)，说明造模成功。给药后，各组大鼠血糖下降，其中以罗格列酮组疗效最显著，与模型组比，有显著性差异(Plt;0.01)；健脾活血方组与模型组比有明显差异(Plt;0.05)，且健脾活血方高剂量组较低剂量组疗效显著，但其降血糖作用不及罗格列酮。经 治疗 后，各组大鼠Fins均下降，ISI提高，其中以中药高剂量组和罗格列酮组改善最为显著，与模型组比有显著性差异(Plt;0.01)，中药高剂量组与罗格列酮组比较无统计学意义。见表1～2。表1 给药前大鼠FBG，Fins，ISI（略）表2 给药后大鼠FBG，Fins，ISI（略）与模型组比较，﹡﹡Plt;0.01，﹡Plt;0.05 　　3.2 对大鼠肝脏细胞膜InsR mRNA表达的影响RT-PCR产物在琼脂糖电泳凝胶紫外灯下均可见：各β-actin电泳条带亮度一致，扩增片段均为300bp。肝脏InsR mRNA的500bp片段，但各组电泳条带亮度有明显差异，模型组大鼠InsR mRNA的表达减弱，与空白组比较有显著性差异（Plt;0.01）；各治疗组大鼠肝脏InsR mRNA的表达增强，以罗格列酮组和健脾活血方高剂量组的改善最为明显，与模型组比较有显著性差异（Plt;0.01）；健脾活血方低剂量组与模型组比亦有明显差异（Plt;0.05）。健脾活血方高剂量组与罗格列酮组比较无统计学意义。见图1～2和表3。表3 对大鼠肝脏InsR/β-actin mRNA RT-PCR电泳产物灰度扫描比值的影响（略）与模型组比较，﹡﹡Plt;0.01，﹡Plt;0.05 　 　4 讨论 　　InsR广泛分布于全身各组织细胞膜，每个细胞约有l×103～105个受体。InsR是由2个-α亚基及2个-β亚基构成。α亚基肽链N端及富含半胱氨酸残基的结构域是胰岛素的结合位点［6］。β亚基跨膜存在于胞质，具有酪氨酸蛋白激酶活性，它又可分为三区：胞外结构域、跨膜区及胞质结构域。胞质结构域又由含酪氨酸的三个区域构成：即近膜结构域、酪氨酸激酶结构域及C末端结构域［6］。近膜结构域为InsR β亚基与胞质内InsR底物结合所必需，在胰岛素信号的传递上发挥关键作用。酪氨酸激酶结构域具有三磷酸腺苷结合部位。InsR β亚基C末端两个酪氨酸磷酸化部位与信息传递蛋白Grb10结合，参与细胞增殖［9］。InsR数目异常及功能缺陷均可影响胰岛素的信号转导。 　 已知胰岛素是通过细胞膜上的InsR起作用的，其作用受细胞上受体密度和亲和力的变化调节。多项研究证明STZ糖尿病大鼠的肝脏、肌肉细胞膜InsR数目受血中胰岛素浓度的影响，即血胰岛素浓度对InsR量呈负向调节：胰岛素浓度升高，受体数目降低，反之则受体数目升高［10］。本实验表明，模型组大鼠肝脏InsR mRNA表达减少，可能与血中胰岛素浓度升高引起的InsR数量减少有关。虽然其胰岛素浓度升高，但是血糖仍然不降，表明胰岛素效应不全，存在细胞内限速反应，即InsR的抵抗。健脾活血方可以上调大鼠肝脏InsR mRNA的表达，结合大鼠给药前和给药后ISI说明健脾活血方对InsR抵抗有治疗作用。 【 参考