儿童和成人急性淋巴细胞白血病中Ki.docVIP

　　儿童和成人急性淋巴细胞白血病中Ki 作者：徐卫, 李建勇, 吴雨洁, 盛瑞兰, 陆凤翔 【摘要】 为了观察Ki-67和Bcl-2在儿童和成人ALL中的表达，探讨其与ALL免疫学分型和临床疗效的关系，用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶（SAP）免疫组织化学染色的 方法 ，对18例儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）和43例成人ALL患者的骨髓或外周血进行Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的检测。结果表明：Ki-67抗原在儿童ALL中的表达略低于成人ALL，但差异无显著性（Pgt;0.05）；而Bcl-2蛋白在儿童ALL中的表达显著低于成人ALL（Plt;0.05）；在儿童和成人ALL各免疫表型中，T细胞、伴有髓系抗原标记的急性淋巴细胞白血病（My+ALL）的Ki-67阳性表达率显著高于成人（Plt;0.05）；儿童和成人ALL的完全缓解率（CR）在Ki-67和Bcl-2两项同时低表达组中最高，仅一项低表达组中次之，两项均高表达组中最低。结论：对儿童和成人ALL患者进行增殖相关抗原Ki-67和抗凋亡蛋白Bcl-2的检测，能反映患者肿瘤细胞的增殖活性和凋亡抑制情况，Ki-67和Bcl-2的表达与白血病ALL类型和临床疗效密切相关。 【关键词】 急性淋巴细胞白血病；Ki-67 抗原；Bcl-2蛋白；免疫组织化学 　　Expression of Ki-67 and Bcl-2 in Adults and Children phoblastic Leukemia and Its Clinical Significance 　　AbstractTo evaluate the expressions of proliferative antigen Ki-67 and apoptosis-antagonizing protEin Bcl-2 as munohistochemistry staining phoblastic leukemia (ALL) and 43 cases of adults ission rate (CR) otherapeutic effects. 　　Key phoblastic leukemia; Ki-67 antigen; Bcl-2 protein; immunohistochemistry 　　急性淋巴细胞白血病（ALL）是一种恶性淋巴增殖性疾病，白血病细胞的过度增殖和凋亡受抑是ALL的发病基础，与ALL的 治疗 和预后也密切相关。对ALL细胞进行增殖和凋亡的 研究 ，有助于揭示部分ALL的发生、 发展 的机制，为ALL的诊断、治疗和预后提供有价值的指标。我们采集了18例儿童ALL和43例成人ALL患者的骨髓或外周血，用免疫组织化学染色的方法检测Ki-67抗原和Bcl-2蛋白的表达水平，了解白血病细胞的增殖与凋亡情况，并进行疗效 分析 。 　　材料和方法 　　研究对象 　　18例儿童ALL和43例成人ALL均为在我院经细胞形态学、免疫学和分子生物学诊断的初诊患者。在儿童组中男性14例，女性4例；年龄2-13岁，中位年龄8岁；其中B-ALL 9例，T-ALL 5例， null-ALL 2例， 伴有髓系抗原标记的ALL（My+ALL） 2例。成人组中男性27例，女性16例；年龄14-72岁，中位年龄36岁； 其中B-ALL 24例，T-ALL 6例，null-ALL 7例，伴有髓系抗原标记的ALL（My+ALL）6例。 　　治疗方法 　　18例儿童ALL中3例采用DOP方案化疗，13例采用DOLP方案化疗，2例采用CDOLP方案化疗。43例成人ALL中有34例住院治疗，1例患者采用DOP方案化疗，10例采用CDOP方案化疗，8例采用DOLP方案化疗，4例采用MOLP方案化疗，11例采用CDOLP方案化疗。 　　测定方法 　　化疗前采集患者的骨髓或外周血（幼稚细胞比例≥0.50），分离单个核细胞。Ki-67阳性对照为K562细胞株，Bcl-2阳性对照为HL-60细胞株。采用链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶（SAP）免疫组织化学染色方法检测。第一抗体鼠抗人Ki-67单克隆抗体（MIB-1，Immunotech公司产品）和Bcl-2单克隆抗体（Bcl-2-124，Dako公司产品）各30 μl，37℃，45分钟；生物素标记的第二抗体30 μl，37℃，15 分钟；链霉菌抗生物素蛋白-碱性磷酸酶溶液的第三抗体30 μl，37℃，15分钟；碱性磷酸酶底物显色，37℃，15分钟（以上各步骤均在湿盒中进行），自来水冲洗，苏木素复染。 　　计数方法 　　油镜下随机计数200个肿瘤细胞， 计算 Ki-67阳性细胞指数（Ki-67LI）和Bcl-2阳性细胞指数（Bcl-2LI）。 　　疗效评价标准 　　疗效判断依据1987年苏州