中药含量测定技术_.pptVIP

* 不对称因子 正常峰（对称） 非正常峰 前沿峰 拖尾峰 色谱峰 ——fs在0.95~1.05之间 ——fs小于0.95 ——fs大于1.05 气相色谱法 操作前准备 样品溶液和对照品溶液的制备：定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制2份。 仪器检查 系统适用性试验：同高效液相色谱法 理论板数 分离度 重复性：相对标准偏差应不大于2.0% 拖尾因子 * 气相色谱法 气相色谱法 气相色谱实验条件的选择 柱温的选择 载气与流速的选择 进样条件的选择 气化室温度——一般稍高于样品沸点 检测室温度——应高于柱温30～500C 进样量——不可过大，否则造成拖尾峰 * 气相色谱法 定性定量分析 定性分析 保留时间比较法 定量分析：以峰高或峰面积定量 峰面积的测量 定量校正因子 定量方法 归一化法 外标法 内标法 内标对比法 * 气相色谱法 定量分析：以峰高或峰面积定量 归一化 法前提：试样中所有组分都产生信号并能检出色谱峰 依据：组分含量与峰面积成正比 优点 简便，准确 定量结果与进样量、重复性无关（前提→柱子不超载） 色谱条件略有变化对结果几乎无影响 缺点： 所有组分必须在一定时间内都出峰 必须已知所有组分的校正因子 不适合微量组分的测定 * 气相色谱法 定量分析 外标法：以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法 工作曲线法：i纯品→工作曲线，同体积样品与之比较 c 前提：进入检测器样品量与峰面积成正比 外标一点法：一种浓度对照物对比样品中待测组分含量 前提：截距为0，对照品浓度与待测组分浓度接近 外标两点法： 前提：选取两点对照品的浓度，需涵盖待测浓度 外标法特点 不需要校正因子，不需要所有组分出峰 结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大 每次进样量应一致，否则产生误差 * 气相色谱法 * 气相色谱法 定量分析-内标法 内标法是以待测组分纯品为对照物，与试样中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法 优点 进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响 只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰无关 适合测定微量组分 缺点： 制样要求高；找合适内标物困难；已知校正因子 对内标物要求： 内标物须为原样品中不含组分 内标物与待测物保留时间应接近且R1.5 内标物为高纯度标准物质或含量已知物质 定量分析-内标法 内标法是根据待测组分与内标物的峰面积比与其浓度比在一定浓度范围内呈线性关系，对组分进行定量分析，对照品溶液和供试品溶液中分别加入相同量的内标溶液，在相同条件下分别测定其中被测组分和内标物的色谱峰峰面积 计算 校正因子的计算 含量计算 * 气相色谱法 检验依据（《中国药典》2010年版一部471页） 【处方】川贝母流浸膏45ml 桔梗45g 枇杷叶300g 薄荷脑0.34g 川贝枇杷糖浆由川贝母流浸膏、桔梗、枇杷叶、薄荷脑四味中药制备而成。薄荷脑具局麻作用，有薄荷的特殊香气，味初灼热后清凉，可掩盖苦味；在乙醇、三氯甲烷、乙醚中极易溶解，在水中极微溶解。《中国药典》采用挥发油测定法（附录X D）试验，用环己烷为溶剂提取、气相色谱法测定薄荷脑含量。 * 气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定 薄荷脑对照品气相色谱图 川贝枇杷糖浆气相色谱图 【含量测定】照气相色谱法（附录Ⅵ E）测定。 色谱条件与系统适用性试验 改性聚乙二醇毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25μm）；柱温为110℃，分流进样，分流比为25:1，理论板数按萘峰计算应不低于5000。 校正因子测定 取萘适量，精密称定，加环己烷制成每1ml含15mg的溶液，作为内标溶液。另取薄荷脑对照品75mg，精密称定，置5ml量瓶中，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀。吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子。 测定法 精密量取本品50ml，加水250ml，照挥发油测定法（附录X D）试验，自测定器上端加水使充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，加环己烷3ml，连接回流冷凝管，加热保持微沸4小时，放冷，将测定器中的液体移至分液漏斗中，冷凝管及挥发油测定管内壁用少量环己烷洗涤，并入分液漏斗中，分取环己烷液，水液再用环己烷提取2次，每次3ml，用铺有无水硫酸钠0.5g的漏斗滤过，合并环己烷液，置20ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，加环己烷至刻度，摇匀，即得。吸取1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。 本品每1ml含薄荷脑（C10H20O）应不少于0.20mg。 * 气相色谱法-川贝枇杷糖浆中薄荷脑的测定 校正因子测定 精密称定环己酮75.15mg