2-2.2陈焕程动物细胞融合和单克隆抗体.ppt

“太空婚礼” 植物体细胞杂交过程示意图 动物细胞融合 合作探究、精讲点拨 小组讨论： 1、什么叫动物细胞融合？其原理是什么？ 2、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合有什么不同呢？（完成学案中的表格对比） 3、为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？ 4、动物细胞融合技术有何意义和应用？ 5.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 小牛试刀 1.能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（ ） A. 离心 B. 灭活的病毒 C. 电刺激 D. 振动 2、融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点？（ ） A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 3、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 探究二：单克隆抗体制备的原理 温故知新： 1、抗体是从何来的？传统的抗体生产方法及缺陷是什么？ 传统的抗体生产方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。这种生产抗体的方法产量和纯度都很低，而且制备的抗体特异性差。 2、B淋巴细胞有什么特点？ B淋巴细胞能产生抗体，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 3、若要想获得大量的单一抗体，如何做呢？ 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 4、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，那么，怎样解决这一问题的呢？ 即如何大量生产单克隆抗体？ 如何大量生产单克隆抗体？ 探究三：单克隆抗体制备的过程 1、如何获得B淋巴细胞？ 2、如果把B淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起时，会有几种融合方式（类型）？ 3、 选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？ 4、如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？ 5、科学家又是如何利用杂交瘤细胞来生产抗体的呢？ 你学会了吗？ * * * * * * 这场“太空婚礼”实质是哪项细胞工程技术呢？ 植物体细胞杂交技术 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 去 壁 人 工 诱 导 融合 人 工 诱 导 再 生 新 壁 脱分化 再分化 探究一：动物细胞的融合 1、概念： 两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 2、原理： 细胞膜的流动性 3、方法： 物理法： 离心、振动、电激 化学法： PEG（聚乙二醇） 生物法： 灭活的病毒 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 仙台病毒 疱疹病毒 新城鸡瘟病毒 灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染细胞，导致疾病,而不能诱导细胞融合。 灭活丧失感染性，但保留融合活性。 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程： 细胞核 灭活病毒颗粒 细胞核 杂交单核细胞 5、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 （膜、质、核融合） 1个完整的杂交细胞AB 6、意义： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段；为制造单克隆抗体开辟了新途径。 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 7、应用： 用途 诱导方法 细胞融合的方法 细胞融合原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 B A B 抗体的传统生产方法: 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点： 产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。 单克隆抗体（杂交瘤技术） ◆ 利用_______________产生特异性抗体的功能。 ◆ 利用________________无限增殖的特性。 ◆ 利用________________技术将两种细胞融合获得杂交瘤细胞。 ◆ 利用_________________技术大量培养杂交瘤细胞。 淋巴细胞 肿瘤细胞 细胞融合 动物细胞培养技术 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 设计方案： 动物细胞融合技术 单克隆抗体 既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 BB、B瘤、瘤瘤 （B、瘤） （一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活 获得产生相应抗体的B细胞 （二选）：