多维气相色谱法检测酒中甲醇.docVIP

　　多维气相色谱法检测酒中甲醇 　摘 要 建立了多维气相色谱检测酒中甲醇含量的方法。采用自动进样器将酒类样品直接注入气相色谱进样口，依次经过非极性RTX-5ms色谱柱和极性HP-INNOaximum residual limit，MRL），蒸馏酒（60度）、白（桃红）葡萄酒、红葡萄酒和伏特加分别为1200， 250， 400和50 mg/L。 　　目前，检测不同样品基质中甲醇含量的方法主要有分光光度法、酶法、毛细管电泳法、高效液相色谱法和气相色谱法。我国制定GB/T 5009.48-2003《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》，规定了酒中甲醇含量的测定方法。在这些已有的分析方法中，配备火焰光度检测器（FID） 的气相色谱法是最常用的方法。但是，传统气相色谱方法只使用一根单独的色谱柱对组分进行分离，在实际检测过程中常会由于共流出化合物的出现，尤其在测定复杂基质样品时，痕量的甲醇被其它色谱峰干扰或者叠加，都会干扰??醇的定性分析，甚至造成误判。多维气相色谱（Multidimensional gas chromatography, MDGC）使用两根不同极性的色谱柱分离样品，在第一根色谱柱中未能充分分离的组分，通过中心切割（Heart-cutting）导入到第二根色谱柱中进一步分离，从而实现常规单柱系统难以达到的高分离性能。加以多维气相色谱和质谱联用在定性分析方面的优势，使得复杂样品中痕量甲醇的检测得以实现。 　　关于酒中甲醇含量的同时准确定性与定量分析尚未见报道。本研究采用多维气相色谱-质谱联用技术，建立了酒类样品（白兰地、伏特加、红葡萄酒和啤酒）中甲醇含量的测定方法。本方法无需前处理，灵敏度高，选择性好，定性准确，为酒中甲醇含量的检测研究提供了技术手段。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　多维气相色谱质谱联用仪（Multidimensional gas chromatography-mass spectrometry, MDGC-MS, 日本岛津公司）。 　　乙醇（HPLC级）；酒类样品：白兰地、伏特加、红葡萄酒和啤酒样品采自上海出入境检验检疫局；甲醇标准品（纯度大于99.9%，德国Dr. Ehrenstorfer公司）：准确称取适量的甲醇标准品，用75%乙醇溶液配制成10000 mg/L的标准储备溶液， 4 ℃冷藏保存；以75%乙醇溶液配制成所需浓度，现用现配。实验用水为超纯水（Millipore公司）。  　　2.2 多维气相色谱-质谱分析条件 　　MDGC-MS系统由两个靠传输线连接的独立的柱温箱系统1D和2D组成。中心切割功能由位于1D柱温箱中的Deans sadzu GC 2010型气相色谱，配有火焰光度（FID）检测器。进样口温度为240 ℃，分流比为50∶1。进样量为1 　　 L。载气为氦气，恒压模式运行，压力为142.1 kPa。1st色谱柱为RTX-5ms （30 m0.25 mm I.D., 0.25 　　 m，Restek公司），流速16.9 cm/s。当进行中心切割时，切割压力为88.3 kPa。柱温采用程序升温： 45 ℃，保持4 min, 然后以30 ℃/min升至250 ℃，保持2.5 min。FID检测器温度为280 ℃。 　　2D系统为Shimadzu GCMS-QP2010 Plus型气相色谱质谱联用仪，配有电子轰击源（Ei）。2nd色谱柱为HP-INNO）进行测定与确证，甲醇的定量离子为m/z31，定性离子为m/z 31, 30和32。中心切割窗口为3.08～3.26 min，传输线温度为250 ℃，1D系统中该时间段内的组分被切割至2D系统进行再次分离。 　　3 结果与讨论 　　3.1 色谱柱选择 　　 　　多维气相色谱一般在1D系统先选用一根非极性色谱柱进行初步分离，在2D系统中选用极性色谱柱进行优化分离。本实验中1D色谱柱选用非极性的RTX-5ms色谱柱。图1是中心切割前，2.0 g/L甲醇标准品与空白样品的叠加色谱图。甲醇保留时间约为3.2 min。 　　一些共流出化合物在RTX-5ms色谱柱上可能不能得到良好分离，并且与目标组分的保留时间相近，干扰甲醇的检测。白兰地和伏特加样品在1D系统中的色谱图如图2所示。由外标法计算得到白兰地和伏特加中甲醇含量分别为2.54和1.56 g/L，其甲醇含量均超过了国家法律规定。由于单一色谱柱的分离能力很有限，痕量目标物常可能被共流出的其它组分干扰，造成检测实际样品时无法进行准确的定量及定性分析。因此，传统气相色谱法根据化合物在单一色谱柱上的保留时间对其进行定性与定量分析是有局限的。在不增加样品前处理步骤的情况下，多维气相色谱-质谱联用可以极大提高色谱系统分离能力。 　　 图1 中