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柴胡皂苷d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响.doc
柴胡皂苷d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响
作者:李素婷,杨鹤梅,齐洁敏,梅立新
【摘要】 目的研究柴胡皂苷d(SSd)对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞(HSC)活化的影响,以探讨SSd抗肝纤维化的作用机制。方法SD大鼠随机分为3组:酒精组、SS-d保护组、正常对照组。利用白酒灌胃辅以高脂饲料方法建立大鼠肝纤维化模型,同时给予SSd保护,12周末处死大鼠。免疫组化检测肝组织α平滑肌肌动蛋白(αSMA)的表达,H.E染色和VanGieson染色观察肝组织病理改变和纤维组织增生,常规生化方法检测肝功能。结果和模型组比较,SSd明显减少肝组织中αSMA的表达;降低血清ALT,AST活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;肝组织病理改变明显好转,纤维组织增生明显减少。结论SSd通过降低αSAM表达,抑制肝HSC的活化达到抗肝纤维化作用。
【关键词】 柴胡皂苷 d 肝纤维化 肝星形细胞 α 平滑肌肌动蛋白
Abstract:ObjectiveTo study the effects of saikosaponin-d (SSd) on the activation of Hepatic Stellate Cells(HSC) and to investigate the main mechanism of SS-d in protection of liver fibrosis.MethodsSD rats ly divided into 3 groups:normal group,ethanol-fed group, SSd interventional group.56% distilled alcohol and high fat diet g·kg-1 once daily.Rats ooth muscle actin (αSMA) munohistochemistry method. Pathological change in liver tissue icroscope by H.E and Van-Gieson staining; the content of liver tissue hydroxyproline(Hyp) and liver histopathology ined by kivchemistry.Resultspared odel group,SSd could reduce the expression of αSMA markedly , improve the pathological changes of liver tissue and decrease the production of fibers significantly,decrease the levels of serum alanine transaminase (ALT),aspartate transaminase(AST) and the contents of liver Hyp significantly .ConclusionSSd can inhibit hepatic fibrosis through inhibiting the expression of αSMA in HSC.
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2 方法
2.1 动物分组及模型的建立
参考 2.5 统计学处理
数据以±s表示,用SPSS 计算 机软件进行统计学分析,组间比较采用t检验。
3 结果
3.1 肝功能及Hyp含量的测定如表1所示,酒精组血清ALT,AST活性明显升高,肝组织Hyp含量亦明显升高;给予SSd保护后,血清ALT,AST活性和肝组织Hyp含量明显降低(P<0.01);表明SSd有保护肝细胞,拮抗肝纤维化形成的作用。表1 SSd对血清ALT,AST活性和肝脏Hyp含量的影响(略)
3.2 肝纤维化病 理学 观察H.E染色:正常组肝组织结构正常,肝细胞排列整齐,肝小叶结构完整,无肝细胞脂肪变性坏死;酒精组大鼠肝组织病理损伤严重,肝小叶结构紊乱,肝细胞呈气球样变及脂肪变性,肝细胞肿胀,胞质疏松,可见较大脂滴;汇管区有炎症细胞浸润,胶原纤维沿汇管区及中央静脉周围向肝小叶内延伸,肝小叶失去正常的结构特点;SS-d保护组上述症状明显减轻,肝细胞有轻度空泡样变性,纤维组织增生明显减少。V-G染色:正常组无明显胶原纤维,酒精组有大量胶原纤维伸入肝小叶,有部分假小叶形成,SS-d组胶原纤维明显减少,纤维隔较薄,无假小叶形成。肝纤维化积分:与酒精组相比,SS-d保护组病理学分期有明显改
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