榄香烯乳联合足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO.docVIP

　　榄香烯乳联合足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO 作者：魏为　唐罗生　李立　杨一涛　王文军 【摘要】 　　目的：观察榄香烯乳联合足叶乙甙对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞凋亡及survivin表达的 影响 及其作用机制。 方法 ：采用榄香烯乳、足叶乙甙单药及两者联合处理视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，观察HXO-RB44细胞生长情况并采用四甲基偶氮唑蓝（MT）结果：HXO-RB44细胞经榄香烯乳、足叶乙甙及两者联合处理后，细胞增殖受到不同程度的抑制(r =0.963，P ＜0.05)，survivin蛋白表达下降(P ＜0.01)；其中以两者联合用药最为显著。结论：榄香烯乳联合足叶乙甙能协同抑制HXO-RB44细胞的增殖，并可能下调survivin的表达，促进细胞的凋亡，抑制RB细胞系增生。 【关键词】 榄香烯乳　足叶乙甙　视网膜母细胞瘤　survivin　凋亡 　　Effect of elemene and/or etoposide on the expression of survivin and apoptosis of retinoblastoma HXO-RB44 cells AbstractAIM: To investigate the effects of elemene and/or etoposide on the apoptosis of human retinoblastoma HRO-RB44 cell and the expression of survivin in vitro. METHODS: The HRO-RB44 cells ene and/or etoposide for 24 hours, and then the proliferation ethod. The survivin expression etry and RT-PCR. RESULTS: Elemene and etoposide could inhibit the groene could enhance the effects of etoposide on proliferative suppression, survivin expression doene; etoposide; retinoblastoma; survivin; apoptosis 　　0引言 视网膜母细胞瘤（retinoblastoma，RB）是婴幼儿最常见的恶性肿瘤之一，严重危害患者的视功能并危及生命。 目前 化学药物 治疗 在视网膜母细胞瘤眼内期病例的保守治疗，眼外期病例的辅助治疗，晚期病例的姑息治疗等方案中起到非常重要的作用[1-3]。近年来由于治疗方法的进步，RB眼球摘除率明显下降，保守治疗的机会增加，寻求有效的药物治疗仍是我们努力的方向。足叶乙甙（etoposide,VP-16）是新一代化疗药物，具有广谱的抗肿瘤活性，但全身大剂量的VP-16化疗能引起肝肾功能损害及骨髓抑制作用，甚至因全身大剂量化疗容易引起继发性恶性肿瘤的发生，最近Lee等[4]曾报道 应用 VP-16治疗后继发急性粒细胞性白血病。因此，探索低剂量多药联合应用，是肿瘤药物 研究 的一个重要方向[5]。榄香烯乳是从活血化瘀中药温莪术挥发油中提取的油状物单体，属于不含氮的倍半烯烃类，为国家二类抗癌新药。实验药 理学 及临床药理学都证实该制剂对多种肿瘤细胞有确切疗效[6]。我们采用榄香烯乳联合VP-16作用于视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞，观察两者对HXO-RB44细胞增殖、凋亡及survivin的表达的影响，研究两者联合用药对HXO-RB44细胞的凋亡及survivin的表达是否具有协同作用。 1材料和方法 1.1材料 HXO-RB44细胞株来自中南大学湘雅医学院肿瘤研究所。胎牛血清为美国Gibco公司产品，RPMI1640培养基购于美国Invitrogen公司。榄香烯乳注射液(elemene)由大连金港制药有限公司生产。VP-16 由齐鲁制药有限公司生产。抗人survivin多克隆抗体购自Santa Cruz公司。FITC购自北京中杉金桥公司。 1.2方法 视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞在37℃ CO2培养箱中培养。取对数生长期的HXO-RB44细胞，调整细胞浓度7.5×107/L,按每孔2 mL接种到6孔培养板中。实验分组：elemene处理组，VP-16处理组，elemene+ VP-16处理组，对照组。每组设6个复孔，分别于培养0、24、48、72h收集细胞。 将对数生长期的HXO-RB44细胞以7.5×107/L加入96孔培养板中,每孔加入180μL的细胞悬液，药物工作液20μL共3块，每组6孔/块），同时每块培养板设6孔对