石榴皮中乌索酸和齐墩果酸含量的反相高效液相色谱测定.docVIP

　　石榴皮中乌索酸和齐墩果酸含量的反相高效液相色谱测定 【摘要】 　　目的建立反相高效液相色谱法同时测定石榴皮中乌索酸和齐墩果酸的含量，并进行方法学考察。方法色谱柱为Kromasil C18分析柱 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)，流动相为甲醇-水-磷酸(88∶12∶0.1)，流速0.8 ml·min-1，光电二极管阵列检测器（PAD），检测波长210 nm，柱温28 ℃。结果在选定色谱条件下线性范围良好，乌索酸和齐墩果酸的样品加样回收率分别为99.3%和98.5 %，RSD为2.20%和1.78%。结论方法测定快速，结果准确、可靠，可用于石榴皮中乌索酸和齐墩果酸含量的定量分析。 【关键词】 石榴皮 高效液相色谱法 乌索酸 齐墩果酸 光电二极管阵列检测器 　　Abstract:ObjectiveTo develop a quantitative method for simultaneous determination of ursolic acid and oleanolic acid in Cortex Granati by RP-HPLC.MethodsHPLC asil C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) at 28℃ using methanol-obile phase l·min-1 and detected .ResultsThe good linear relationship um conditions. The recoveries of the standards added for ursolic acid and oleanolic acid ethod is rapid and precise.It can be used to determine the ursolic acid and oleanolic acid in Cortex Granati. 　　Key L.的干燥果皮，味酸、涩，性温，具有涩肠止泻、止血、驱虫之功效，可用于久泻、久痢、便血、虫积腹痛等的 治疗 ，为历版《 中国 药典》所收录，含量测定项以鞣质为定量标准［1］。石榴皮含多种化学成分，如没食子酸、石榴皮亭A、石榴皮亭B、鞣云实精、鞣花酸、安石榴林等［2］。安明等［3］研究了石榴中乌索酸的最佳提取工艺条件，并按《中国药典》1995年版Ⅰ部山茱萸项下方法测定了石榴中乌索酸的含量，但石榴皮中乌索酸和齐墩果酸的成分鉴定研究和含量测定均未见 　　2.4 溶液配制 　　2.4.1 对照品溶液 　　分别精密称定乌索酸、齐墩果酸对照品3.59 mg和1.74 mg，置于10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成对照品混合溶液，备用。 　　2.4.2 石榴皮样品溶液精密称取约5 g烘干的石榴皮（粉碎过80目筛）置具塞三角烧瓶中，分别加入40 ml乙醇超声提取90 min，过滤，滤渣用乙醇洗涤2次，合并滤液，转移至50 ml容量瓶中，定容。滤液离心后用微孔滤膜（0.45 μm）过滤，取续滤液作为样品溶液。 　　2.5 线性关系考察分别精密吸取乌索酸和齐墩果酸对照品混合溶液中1，4，8，12，16 μl进样分析，按色谱条件测定峰面积，以对照品进样量(μg)为横坐标，峰面积(μV·s)为纵坐标，进行线性拟合，得乌索酸线性回归方程为：Y=6.44×105X-5.83×104（r=0.999），齐墩果酸线性回归方程为：Y=7.54×105X-3.70×104(r=0.999)。表明当乌索酸进样量在0.359～5.744 μg，齐墩果酸进样量在0.174～2.784 μg时，线性关系良好。 　　2.6 精密度实验 精密吸取乌索酸和齐墩果酸的对照品混合液进样分析，平行5次，测得乌索酸峰面积相对标准偏差RSD为0.47%（n=5），齐墩果酸峰面积RSD为0.66 %（n=5）。表明进样方法和仪器系统精密度良好。 　　2.7 重现性实验精密称取同一批石榴皮样品5份，制备样品溶液，进样分析。测得乌索酸峰面积RSD为1.49 %（n=5），齐墩果酸峰面积RSD为2.05 %(n=5)，表明重现性良好。 　　2.8 加样回收率实验 精密称取已知乌索酸和齐墩果酸含量的石榴皮样品6份，分高、中、低3种浓度分别加入乌索酸和齐墩果酸对照品适量，样品同时处理，制备石榴皮样品溶液，进样分析，测定样品中乌索酸和齐墩果酸的含量， 计算 加样回收率。乌索酸和齐墩果酸的平均加样回收率分别为99.3%（RSD=2.20%）和98.5%（RSD=1.78%）。 　　2.9 样品含量的测定取不同石榴皮样品溶液在上述色谱条件下进样分析，平行3次，测定峰面积，按外标法计算乌索酸和齐墩果酸平均含量。不同石榴皮样品中乌索酸和齐墩