蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降脂保肝作用.docVIP

　　蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降脂保肝作用 【摘要】 　　目的研究蝇蛆壳聚糖的降脂保肝作用。方法通过喂饲SD大鼠高脂饲料,建立实验性高脂血症模型,并用蝇蛆壳聚糖进行 治疗 ,测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C) 、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)含量,测定肝脏系数和肝组织中胆固醇含量,并对各组大鼠肝脏进行病理观察。结果蝇蛆壳聚糖能显著降低实验性高脂血症大鼠血清TC，TG，LDL-C水平，升高血清HDL－C水平,降低大鼠的肝脏系数及胆固醇含量,并能减轻肝细胞脂变程度。结论蝇蛆壳聚糖能调节实验性高脂血症大鼠血脂代谢,抑制肝脏脂肪沉积,有良好的降脂保肝作用。 【关键词】 蝇蛆壳聚糖 实验性高脂血症 大鼠 降脂保肝 　　甲壳素是地球上除纤维素之外最丰富的天然高分子聚合物，也是昆虫体内构成昆虫体壁的主要成分之一。将甲壳素在强碱液中加热处理，其分子结构中的乙酰胺基就会水解脱去乙酰基，留下游离的氨基，成为壳聚糖。壳聚糖是一种具有重要开发价值的天然多糖物质，具有免疫调节、降低体重和胆固醇、抗肿瘤、调理肠胃、抗凝血、抗菌等多种生物活性［1］。高脂血症是动脉粥样硬化形成的原因之一已被确认，而肝脏是脂质代谢的中心。本实验采用高脂血症大鼠模型，观察蝇蛆壳聚糖对血清及肝脏脂质含量及肝脏病理形态学的影响。 　　 1 材料与仪器 　　1.1 动物SD大鼠，雄性，100只，体重180～205 g，由贵阳医学院实验动物中心提供。 　　1.2 药品与试剂蝇蛆皮，由琨恩生物技术有限公司提供。蝇蛆壳聚糖，自制。虾蟹壳聚糖，购自济南海得贝生物工程有限公司。胆固醇，分析纯， 中国 医药(集团)上海化学试剂公司产品。批号：总胆固醇试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒， 均由北京中生北控生物科技股份有限公司生产。 　　1.3 饲料基础饲料，由贵阳医学院实验动物中心提供。高脂饲料，用1％胆固醇、5％猪油、10％蛋黄粉及85％基础饲料配制而成。 　　1.4 主要仪器OLYMPUS-AU400全自动生化分析仪；OLYMPUS显微镜(日本OLYMPUS)。 　　 2 方法 　　2.1 分组及造模用基础饲料适应性喂养SD大鼠5 d后，随机分为6组，每组10只。正常对照组每日以基础饲料喂养，灌胃给等量蒸馏水；高脂模型组每日以高脂饲料喂养，灌胃给等量蒸馏水；壳聚糖低、中、高剂量组自造模日起给高脂饲料的同时分别灌胃蝇蛆壳聚糖300,600,900 mg/kg，给药1次/d。阳性对照组每日以基础饲料喂养，灌胃给虾蟹壳聚糖600 mg/kg，给药1次/d。 　　2.2 TC，TG，HDL-C，LDL-C的测定以上各组均连续给药4周，动物自由进水。给药第2周，大鼠禁食不禁水12 h，断尾取血，分离血清测定TC，TG，HDL-C，LDL-C水平；于实验结束前1天末次给药后，大鼠禁食不禁水12 h，股动脉放血处死，取血并分离血清测定TC，TG，HDL-C，LDL-C水平。 　　2.3 病理形态学观察及肝脏脂质测定取出肝脏并称肝重（L处，横切一块肝组织，用中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡切片，HE染色，光镜下观察肝脏病理形态学改变。于剩余肝脏中取组织，在蒸馏水中漂洗数次，滤纸吸干，称重1g，放入组织匀浆器，加3 ml生理盐水匀浆10 min,将浆液放入冰箱（－20℃）3～4 h，进行肝脏脂质测定。 　　2.4 统计学处理全部数据采用±s表示，采用SPSS13.0统计软件Independent Samples T Test进行分析。Plt;0.05 和Plt;0.01作为显著性差异界值。 　　 3 结果 　　3.1 蝇蛆壳聚糖对高脂模型大鼠血清血脂水平的影响给高脂饲料后，高脂模型组大鼠血清TC，TG，LDL-C含量持续显著升高，HDL-C含量持续显著降低，与正常对照组相比，差别有显著性意义（Plt;0.01），表明高脂模型造模成功。给予蝇蛆壳聚糖，各剂量组TC，TG，LDL-C含量均降低，HDL-C含量均升高，除低剂量组外，与高脂模型组比较有显著性差异（Plt;0.01）。同时，随着给药时间的增加，壳聚糖抑制了因高脂饮食造成的血清TC，TG，LDL-C含量的升高，HDL-C含量的降低（见表1～2）。 　　表1 蝇蛆壳聚糖对大鼠血清TC、TG水平的影响（略） 　　与正常对照组比较，*Plt;0.05，**Plt;0.01;与模型组比较，▲Pgt;0.05,△Plt;0.05,△△Plt;0.01；n=10 　　表2 蝇蛆壳聚糖对HDL-C、LDL-C水平的影响（略） 　　与正常对照组比较，*Plt;0.05，**Plt;0.01;与模型组比较，▲Pgt;0.05,△Plt;0.05