Section2RNA结构与功能多样性.pptVIP

3.3 RNAi和DNA切除： 具有纤毛的原生动物(如嗜热四膜虫）在性接合过程中，其基因组发生广泛的重组，并将多余的DNA进行程序性切除——称为基因沉默的根本形式。 这种单细胞动物有两类功能不同的核，1个二倍体微核（提供种系储备和在赘生物生长中发生转录性沉默），1个多倍体巨核（转录性）。 嗜热四膜虫滋养细胞接合过程 (g和h期发生内部切除片段IES的整体切除) 其中3个被降解 两次 嗜热四膜虫微核?巨核的新核发育过程中伴随着种系DNA序列（内部切除片段，internal eliminated segment, IES）的整体性切除： 剩余的 接合早期微核基因双向转录，并形成dsRNA 形成dsRNA 被Dicer切割成小RNA，称扫描RNA（scnRNA） scnRNA进入旧的巨核（没有IES），与基因组DNA可以配对的scnRNA被降解（除了IES） 同源的IES序列H3K9甲基化,使 Pdd1：程序性DNA降解蛋白，识别并结合IES序列中Lys-9 甲基化的H3。 Twi1：与小RNA结合，为Piwi相关蛋白。 3.4 减数分裂性沉默、配对和RNAi： 除了RNA之间的相互作用引起基因沉默外，还存在同源的DNA-DNA配对引起的基因沉默。 一些生物中（如链孢霉属），未配对基因组区域的沉默发生在减数分裂期：首先在DrRP指导下以未配对DNA单链为模板合成ssRNA；然后由RdRP Sadl催化其双链化；这些dsRNA被DCR加工为小RNA，并被组装进入RISC；然后靶定与未配对区域同源的所有转录本，甚至基因组中起源于同源的配对区域，并降解。 降解 ssRNA 减数分裂中未配对DNA的沉默 同源RNA 起源于同源区的RNA RdRP dsRNA 4。RNAi的应用前景及成果： 优点： 曾用反义RNA 与靶mRNA 序列互补的特性来抑制其表型的发生，但由于反义RNA对内源性表达的基因抑制作用较弱，往往会产生一些过渡表型，易造成对基因功能判断错误，目前已通过审批认为临床上具有治疗作用的仅有一种药物 ——Vitravene 。 RNAi 技术与之相比，特异性更高，作用更迅速，副反应小，在有效地沉默靶基因的同时，对细胞本身的调控系统没有影响；而且一个分子可诱发数十个甚至数百个靶mRNA的降解，而反义RNA需要过量的反义单链的作用。 因此，RNAi 成为一种高效的、特异性强的基因阻断技术，近年来发展迅速，很快就成为功能基因组研究的有力工具。 成果： 1）通过实验手段将dsRNA 分子导入细胞内, 特异性地降解细胞内与其序列同源的mRNA；封闭内源性基因表达，从反向遗传的角度研究人类或其他生物基因组中未知基因的功能。 2）最近在人类体细胞里已经成功地对近20 种基因功能进行了“敲除”，尤其是因此而了解了人类空泡蛋白Tsg101 对HIV 在人体内增殖的作用，进一步深化了对HIV 的研究。 3）Leonid 等以脊髓灰质炎病毒为模型，利用RNAi 来诱导细胞的胞内免疫，产生抗病毒效应，尤其是针对RNA 病毒。对于易突变的病毒,可设计多种靶向病毒基因保守序列的dsRNA，减少它对dsRNA 的抵抗。 4）Maen 等也应用RNAi 技术成功地阻断了MCF-7 乳腺癌细胞中一种异常表达的与细胞增殖分化相关的核转录因子基因Sp21 的功能。 展望： RNAi 技术的应用，不仅能大大推动人类后基因组计划(蛋白组学) 的发展，还有可能设计出RNAi 芯片，高通量地筛选药物靶基因，逐条检测人类基因组的表达抑制情况来明确基因的功能，并且还将应用于基因治疗、新药开发、生物医学研究等领域，用RNAi 技术来抑制基因的异常表达，为治疗癌症、遗传病等疾病开辟了新的途径。 四、RNA组学 RNA组学：主要研究细胞中各种小分子RNA的种类、结构与功能。 * * * * * tRNA样区域的结构和折叠方式类似典型tRNA的四叶草结构，其结构的维持与D和T环之间的相互作用有关。虽然tRNA样区域没有密码子-反密码子复合体以供核糖体A位识别，有证据表明tmRNA自身或与其结合的蛋白质具有类似核糖体A位识别功能。 tRNA样区域周围有高度保守的碱基序列，对tmRNA的空间构像和功能有重要作用，同时tRNA样区域同其mRNA区域也存在着相互作用。 四个假结状结构中，离tRNA样区域最近的PK1区域被认为对维持tmRNA功能有关，其余3个假结状结构似乎作用不大。PK2区域在某些细菌中有亚结构存在，可能与tRNA样区域和mRNA区域的相互作用有关。 2。tmRNA作用模型：反式翻译模型，Karzai 等提出 ??? 基于缺失终止密码子的tmRNA作用的模型 细菌中蛋白质如在转录过程中由于某种蛋白质因子结合在某基因的操纵子区域而影响了转录子的完整性，或是转录子在转录