CHARP2色谱法概论〔一〕.pptVIP

tr1= 16.40 tr2= 17.63 ，W1=1.11, W2=1.12 1） 2-6 色谱定性和定量方法 一 色谱定性方法 定性——峰的归属 定性指标——保留值， 定性方法: 1、用已知物对照定性 2. 据经验式定性 3. 据相对保留值 ri,s 定性： 4. 保留指数(Kovats指数)定性 5.双柱法 6.联用技术。 1、用已知物对照定性 一定操作条件下，各组分保留时间是一定 具体做法： 1）分别以试样和标准物进样 2）对照：试样中某峰的保留时间和标样中某峰重合，则可初步确定试样 中含有该物质。 3）样品中加入标准物，峰增加来确定。 2. 据经验式定性 1）碳数规律：lgtr’=An+C (n?3) 2）沸点规律：lgtr’=ATb+C 3. 据相对保留值 ri,s 定性：温度一定 4. 保留指数(Kovats指数)定性(重现性较好的定性指标) 求出未知物 Ix， 与文献值对照。 5. 双柱或多柱定性 6. 与其它方法结合定性 如GC-MS，GC-IR，GC-MS-MS 正构烷烃碳数 调整保留时间 tr’, min 2,2-二甲基丁烷 苯 甲苯 Kovats指数的计算图示 (Squalane, 60oC) 2.7 色谱定量方法 色谱定量的依据：对于同一组分，峰值与进入检测器的量成正比。 峰值 由于检测器对各个组分的灵敏度是不一样的，因此计算某组分的质量分数时，应将测得的峰值校正后方可进行。 峰面积 A 峰高 h A=1.065 ? h ? W1/2 A=1/2 ?h ?(W0.15+W0.85) 二、定量校正因子 （Quantitative calibration factor） 绝对校正因子： 相对校正因子：用标准物质为参照物、求出待测物质与标准物之间绝对校正因子的比值。 1.质量校正因子（Mass calibration factor fm ） 2.摩尔校正因子（Molar calibration factor fM ） 注：检测器不同而标准物不同 校正因子只与试样、标准物和检测器类型有关， 1. 归一化法 若n个组分全部出峰，则i组分的百分含量wi(%)为： 几种常用的计算办法 2.内标法 将一定量的，纯物质作内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测物和内标物的质量，及其在色谱峰上的峰面积比，求出某组分的含量。 原理：若试样中组分质量为mi ,质量分数为wi , 在其中加入质量为ms的内标物，试样质量为m,则 一般以内标物为基准，fs=1, 则上式可简化为： * 只需测量试样中的几个组分，试样所有组分不能全部出峰时，可采用此法。 * 由于是通过测量被测物和内标物在色谱峰上的峰面积比值来进行计算的, 因而由于操作条件变化而引起的误差， 都将同时反映在被测组分和内标物的面积上，所以可以 得到较准确的结果。 内标物的选择： * 试样中不存在 ** 峰保留时间较接近，但与组分完全分离。 ***与组分的物理化学性质接近，有利于操作条件变化时，被测组分和内标物的面积作匀称的变化。 3. 外标法： 以欲测组分的纯物质来制作标准曲线。 准确度取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。 定量方法 计 算 式 优、 缺 点 外标法 不用校正因子；严格控制操作条件，试样、标样的进样量须相等 内标法 操作条件，进样量不要求严格控制；m, ms需称量确定，寻求内标物要经过试验 归一法 操作条件、进样量不要求严格控制；必须保证试样中各个组分全部出峰 第二章 色谱法基础（一）An introduction to chromatography 一色谱法概述 二色谱图和有关术语 三色谱法基础理论 1.塔板理论 2.影响谱带扩张的因素 3.速率理论方程 4.分离度 色谱定性与定量分析方法 色谱定性方法 色谱定量方法 2.1 色谱法和有关术语 2.1.1 Tswett实验 色谱法（chromatography） 色谱柱、固定相、流动相。 色谱法是一种分离方法，色谱分离的基础是混合物中各组分在两相中分配系数的差异。 分类 2.1.2 色谱图和有关术语 色谱图 色谱峰、基线、峰高(h) 保留值: 死时间t0 保留时间tR 调整保留时间t′R 死体积 保留体积 调整保留体积 V’R = VR - VM = Fco·t’R 相对保留值 分离因子 是表示色谱选择性的参数 区域宽度：用于衡量柱效及反映色谱操作条件下的动力学因素