REACH法规第五卷译稿–22.docVIP

C.14. 幼鱼的生长测定 方法 这里的毒性测定方法取自经济合作与发展组织(OECD) TG 215 (2000) 1.1 引言 这一个设计用来进行长期暴露在化学药品下对幼鱼生长的影响的测定。这种方法在欧盟发展出来并经过其检测（1）（2）。为估定在流通条件下的化学药品对幼年的虹鳟鱼 (Oncorynchus mykiss) 的生长效果。其他的被证明良好的种类也可能使用。举例来说，从zebrafish (Danio rerio)2 (3)(4) 和 ricefish (medaka, Oryzias Latipes) (5)(6) 的生长测定已经得到经验 (7)。 参见总引言第C部分。 1.2 定义 最低可观测有效浓度(LOEC)：是某种检测物质和对照组相比可观察到明显作用p0.05的最低浓度。 无可观测有效浓度(NOEC)：检测浓度低于LOEC。 ECx：在这种检测手段下指与对照组相比使鱼生长变化的x%的检测物质浓度。 装载率：单位体积水中鱼的湿重。 数密度：单位体积中鱼的条数。 单个鱼特定生长率：表示单个鱼相对于原始体重的生长率。 整个容器平均特定生长率：在同一浓度下整个鱼缸中鱼群的平均生长率 伪特定成长率: 表达个别鱼的生长率与每缸鱼平均初始体重。 1.3 检测方法的原理 在称重后，将处于指数增长期的幼鱼放入检测室中，暴露在将检测物质溶于水中达到非致死浓度的溶液中，最好是流动相，若不能，就在接近半静态（静态更新）条件下。检测持续28天。期间鱼食物供应很差，按照初始重量投食，可能在14天后重新计算食物供应量。在检测结束后，重新称量鱼的重量。生长率的效果用回归模型来计算生长率变化x％的浓度。即：ECx（例如，EC10，EC20，EC30）。 Meyer, A., Bierman, C.H. and Orti, G. (1993). The pHyLogenetic position of the zebrafish (Danio rerio), a modeL system in deveLopmentaL Biology: an invitation to the comparative method. Proc. R. Soc. Lond. B. 252, 231-236. 换句话说，用实验数据与对照组比较来计算LOEC和NOEC。 1.4 检测物质的信息 一个急性中毒的测定（参见测定方法C.1.）更适宜实现这个测定中物质的选择，应该可以采用。这暗示检测物质的水溶性和蒸汽压是已知的，而且要一个达到已知和报道中的精度和检出限的可靠分析方法用于检测溶液中物质的定量测量。 结构公式，物质的纯度，在水中和光照下的稳定性，Pka，Pow以及预备生物降解℃的结果都是有用的信息。 检测的有效性 为使测定有效，应用下列条件。 － 对照组的死亡率在测定结束的时候不能超过 10%; － 必须充分增加对照组的平均重量，以使增长率的最小检测量比较显著。鉴定测定表明在28天中，虹鳟鱼对照组体重的增长必须至少一半（50％）于其初始重量。例如，初始重量1g/条（＝100％），28天后重量：≥1.5g/条（≥150%） － 整个测定中水中溶解氧的浓度必须至少是空气中饱和值ASV的60％。 － 在测定期间水温变化不能超过±1，测定容器的温度浮动在任何时候都须在2℃范围内，这是物种要求的温度范围。（见附件1）。 1.6 测定方法描述 1.6.1 仪器 使用通常的测定设备，尤其是以下几种： － 氧气和pH计； － 测定水硬度和碱度的设备； － 适当的控温仪器，最好能连续监控； － 用化学惰性的材料制成的容器，容积要考虑到装载率和数密度（见1.8.5节和附件1） － 适当精度的天平（就是说精确到0.5%） 水 只要检测鱼的种类能够长期生存并生长的水都可以作为测定用水。它在此测定期间的水质应该是不变的。水的pH值应该在6.5到8.5之间，但是在一个具体的测定中，pH值的浮动不能超过±0.5个单位。推荐硬度在140mg/L以上。为了保证稀释液不过度的影响测定结果（例如检测物质中的配合物影响），用于分析的样品水必须间隔采样。重金属元素（如Cu, Pb, Zn, Hg, Cd 和Ni），主要阴阳离子（如Ca, Mg, Na, K, CL 和SO4）,农药（如总有机磷和有机氯农药），总有机碳和固体悬浮颗粒都要作测定，例如，每三个月中稀释液的质量要保持相对恒定。如果能够证明水质在至少一年内无变化，检测可以不必如此频繁，间隔可以扩大（例如每六个月测一次）在附件 2 中列出了一个可接受的稀释液的一些化学的特性。 1.6.3