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　　不同品种西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC分析 作者：张婵娟，郭晓玲，孟青，冯毅凡 【摘要】 目的 建立西兰花种子中莱菔硫烷的HPLC含量测定 方法 。方法 色谱柱： C18 (150 mm×4.6 mm,5μm)；流动相：甲醇水(体积比30∶70)；流速：1.0 mL/min；PDA检测器；检测波长：240 nm；柱温:30 ℃。结果 莱菔硫烷在14.6～292.5 μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9994，平均回收率为97.32%（RSD=1.2%）。结论 本法简便、准确，重复性好，可用作西兰花种子的质量控制，为不同产地不同品种的西兰花种子的收购及栽培等提供有效监控依据。 【关键词】 西兰花种子；莱菔硫烷；HPLC；含量测定 　　Abstract:Objective To establish a method for content analysis of sulforaphane in broccoli seeds.Methods Samples m×4.6 mm,5 μm) column by using methanolobile phase. The flol/ min.The detection .The column temperature l for sulforaphane (r=0.9994).The average recovery of sulforaphane ethod is simple,accurate,reproducible and can be used for the quality control of broccoli seeds. 　　Keypoa公司，含量＞98%)；实验所用样品见表1,经本院生药教研室鉴定均为西兰花种子。 　　表1 不同品种西兰花种子样品（略） 　　Tab.1 Sample of different kinds of broccoli seed 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱： C18 (150 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇水(体积比30∶70)； 流速：1.0 mL/min；检测波长：240 nm；进样量：10 μL；柱温30 ℃。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取莱菔硫烷对照品5.85 mg， 置20 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，得到质量浓度为292.5 μg/mL的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取不同品种的西兰花种子，粉碎成粉末，过20目筛,取粉末0.3 g,精密称定，加1 mL蒸馏水,超声30 min后，置 35 ℃水浴水解4 h,加入10 mL甲醇，超声30 min后，滤过,滤渣用约8 mL甲醇分3次洗涤，合并滤液并定容至20 mL。再经0.45 μm滤膜滤过得供试品溶液。 　　2.4 系统适用性试验 　　分别吸取对照品及西兰花药材溶液各10 μL，注入液相色谱仪。在此条件下，莱菔硫烷色谱峰与其相邻组分峰达到基线分离， 理论 塔板数以莱菔硫烷计不低于5 300。见图1。 　　A.莱菔硫烷对照品; B.西兰花种子样品 　　图1 HPLC色谱图（略） 　　 　　Fig.1 HPLC chromatogram 　　2.5 线性关系考察 　　精密量取“2.3”项下储备液分别用甲醇稀释制成质量浓度为14.6、58.5、117.0、175.5、234.0和292.5 μg/mL的对照品溶液，分别进样20 μL，以峰面积(A )对质量浓度(ρ)进行回归 分析 ,得回归方程:A=3 743.7ρ-2 878.2,r=0.999 4。结果表明莱菔硫烷的质量浓度在14.6～292.5 μg/mL范围内与峰面积线性关系良好。 　　2.6 重复性试验 　　精密称取1号种子粉末6份,按“2.4”项下制备，依法测定莱菔硫烷的含量。结果平均含量为1.4014%,RSD为0.49%。 　　2.7 中间精密度试验 　　精密吸取浓度为292.5 μg/mL的对照品溶液10 μL,重复进样6次,以莱菔硫烷峰面积 计算 ，RSD=0.14%，表明中间精密度良好。 　　2.8 稳定性试验 　　取重复性试验中同一浓度供试品溶液室温下放置，于0、2、4、6、8h后依法测定莱菔硫烷的含量，结果其RSD值为0.84%，表明样品溶液在8 h内测定结果稳定。 　　2.9 加样回收率试验 　　精密称取9份已知含量的1号种子样品0.15 g,按“2.4”项下，同法制成供试品溶液。经0.45 μm微孔滤膜过滤，各取续滤液0.5 mL，分别置于25 mL量瓶中，分别加入不同量的质量浓度为292.5 μg/mL的莱菔硫烷对照品溶液0.1、0.2、0.3 mL，甲醇