中药益智仁盐炙工艺的正交实验法研究.docVIP

　　中药益智仁盐炙工艺的正交实验法研究 作者：李兴迎 胡昌江 林辉 黄勤挽 李兴华 【摘要】 　　目的优选盐炙益智仁的最佳工艺。方法采用正交设计L9（34），以挥发油、水浸出物和诺卡酮（nootkatone）的含量为考察指标。结果最佳盐炙工艺为100 g饮片，用2 g食盐加40 ml水溶解后，与益智仁拌匀，闷润30 min，在250℃下炒炙8 min。结论优选得到的工艺稳定、合理、可行。 【关键词】 益智仁；炮炙；正交实验 　　Abstract：ObjectiveTo optimize the technology of processing Ructus Alpiniae Oxyphyllae. MethodsOrthogonal design L9（34） al procedure ixed homogeneously at 250℃ for 8 min .ConclusionThe technology is stable, reasonable and viable. 　　Key art仪器有限公司）。 　　1.2 试药 　　Nootkatone对照品(购买于Alfa Aesar，批含量大于98％），乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。 　　1.3 药材 　　购于成都五块石药材市场，经本校生药教研室李敏教授鉴定确认为《中国药典》规定的姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟果实。将益智去壳得到益智仁饮片。 　　2 方法与结果 　　2.1 盐炙益智仁样品的制备 　　按正交实验设计安排益智仁炮制实验（表1，表2），称取益智仁饮片分别加入2%的盐（预先用药材量40%水溶解，再均匀喷洒），闷润不同时间，然后置于设定不同温度的锅中，不停翻炒直至设定的时间，立即取出，摊放至凉，装袋备用。表1 正交实验因素及水平设计（略） 　　2.2 挥发油含量测定 　　照挥发油测定法《中国药典》2005年版附录XD甲法项下规定操作，以饮片形式，在筛选提取条件（加12倍量水，浸泡2 h，提取8 h）的基础上进行测定。结果见表2。 　　2.3 水浸出物含量测定 　　按《中国药典》2005年版附录XA下热浸法进行测定。结果见表2。 　　2.4 Nootkatone含量测定结果见表2。表2 实验安排及结果（略） 　　2.4.1 色谱条件 　　色谱柱为diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)。流动相为乙腈-水（70∶30）；流速1.0 ml/min；检测波长235 nm；柱温35℃。理论塔板数按nootkatone峰 计算 为3 000以上。同时取阴性供试品溶液进样，结果表明，阴性供试品在nootkatone色谱峰位置处无相应峰出现。对照品阴性及样品供试品的高效液相色谱图。见图1～3。 　　2.4.2 对照品溶液的配制 　　精密称取对照品Nootkatone 24.18 mg置于25 ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,精密移取1 ml于25 ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀即得浓度为0.038 69 mg/ml的对照品溶液。 　　2.4.3 供试品溶液的制备 　　经筛选后为：精密称取盐益智仁粗粉约1 g置于25 ml容量瓶中，加入20 ml甲醇超声提取30 min，放冷后滤至25 ml容量瓶中，残渣用适量甲醇洗涤，滤过，合并滤液，定容至25 ml。精密量取此溶液1 ml至10 ml容量瓶中，加入甲醇定容，用0.45 μm微孔滤膜过滤,吸取续滤液进样,测定其含量。 　　2.4.4 线性关系的考察精密量取Nootkatone对照品溶液(0.038 688 mg/ml) 2, 4, 6. 8, 10，12 μl进样，记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归，得标准曲线方程A=1E+07C-412 65，r=0.999 5。结果表明,在0.077 38～0.464 26 μg范围内,线性关系良好。 　　2.4.5 精密度实验精密吸取上述对照品溶液10 μl，重复进样5次，Nootkatone峰面积的RSD=0.91%。结果表明，精密度良好。 　　2.4.6 稳定性实验 　　取样品供试液20 μl，分别于0, 2, 4, 6, 8 h进样，测得样品中峰面积值的RSD=0.95%，结果表明供试品溶液在8 h内稳定。 　　2.4.7 重复性实验 　　按拟定的含量测定方法，对同一批样品，分别制备供试品液，测得峰面积值并计算含量，RSD=1.55%。结果表明该方法重复性良好。 　　2.4.8 回收率实验 　　取已知含量的样品约0.5 g，精密称定后，分别加入对照品溶液(0.967 2 mg/ml)按上述样品制备方法和色谱条件，制备加样回收供试