第23章-氧化应激损伤的生物化学诊断.pptVIP

(二) ·OH检测 (三) H2O2的检测 (一) O2 的检测 · 一、主要活性氧的检测 * NBT还原法 高铁细胞色素C还原法 羟胺氧化法较为常用 1. 物理检测方法 (一) O2 的检测 · 电子自旋共振(ESR)波谱分析法——直接法 电子顺磁共振(EPR)波谱分析法——间接法 优点：操作均较简单 缺点：需昂贵的仪器，应用均受到限制 2. 化学检测方法——间接法 * 一种较灵敏检测O2的方法，其检测限量可达1μg/L。 · 具有设备简单，试剂便宜易购，操作简便，专一性好，结果较为准确等优点，适合于一般实验室的检测。 羟胺氧化法 O2 能与羟胺溶液反应生成NO2－，NO2－与对氨基苯磺酸和α-萘胺显色，在波长530nm处有专一吸收峰，其颜色深浅与产生的O2 呈量效关系。 · · 【方法学评价】 【注意事项】 严格控制反应系统pH＜8.0，尽可能降低反应中的溶解氧及铁含量，这样测出的O2 产生速率才更接近实际水平。 · * (二) ·OH检测 原理是无荧光的对苯二甲酸与·OH反应形成强荧光的羟-对苯二甲酸加成物，315nm激发，可发射425nm荧光，可检测受物理因素及化学因素处理后水溶液中产生的·OH。 自旋捕捉法 气相色谱法(GC) 高效液相色谱(HPLC) 优点：准确度较高 缺点：操作繁