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基于使用Bi S 纳米棒、甲基结合域蛋白和抗His 标签 2 3 抗体的光电化学免疫传感器对甲基化DNA 检测的新策略 A new strategy for methylated DNA detection based on photoelectrochemical immuno- sensor using Bi2S3 nanorods, methyl bonding domain protein and anti-his tag antibody Huanshun Yin, Bing Sun, Yunlei Zhou, Mo Wang, Zhenning Xu, Zhengliang Fu, Shiyun Ai Biosensors and Bioelectronics 2014, 51, 103–108 DOI 10.1016/j.bios.2013.07.040 范围 1300011776 (北京大学化学与分子工程学院 北京 100871) 摘要： 本文中，作者制备了一种新型的检测DNA 甲基化的光电化学免疫传感器，其中 利用Bi S 作为光电转化材料、MBD1 蛋白作为DNA 甲基化识别单元、抗His 标签 2 3 抗体提高检测灵敏度。结果显示Bi S 光电性质优越。作者对诸如Bi S 浓度， 2 3 2 3 MBD1 浓度，MBD1 的培养时间，抗体浓度及抗体培养时间等检测条件进行了优 -9 -13 化。在优化实验条件下，光电流变化与靶DNA 浓度的对数值在10 至10 M 的区 -14 间内呈线性关系甲基化，检出限为3.5×10 M （S/N=3 ）。另外，该免疫传感器具 有高检测特异性，可以分辨单碱基错配序列。 关键词： DNA 甲基化；光电化学免疫传感器； Bi S 纳米材料；甲基结合域蛋白；抗 2 3 His 标签抗体 1. 引言 DNA 甲基化在原核生物及真核生物的基因表达，真核生物的发育及细胞分化等方面起 到了重要的调节作用，是重要的表观遗传过程。而异常DNA 甲基化可能导致肿瘤抑制基 因的失活从而引发癌症。因此，对DNA 甲基化高灵敏度及高特异性的分析检测对与异常 DNA 甲基化有关疾病的诊断具有重要意义。在此之前，已有许多方法提出：重亚硫酸盐耦 合荧光检测法，基于DNA 甲基转移酶-限制性内切酶的荧光检测法以及电化学检测法，基 【】 [1] 2 于聚合酶链式反应的技术，比色分析法 ，高效液相色谱 以及液相色谱-质谱联用法。然 而上述方法分别存在一些问题：重亚硫酸盐分析法需要长时间将胞嘧啶转化为尿嘧啶，可 能导致DNA 明显降解；基于DNA 甲基转移酶-限制性内切酶的检测法受到酶失活的限 制；色谱法耗时成本高。因此，仍需要开发新方法避免上述缺点。 光电生物传感器是一类新开发的生物分析法，目前已有多种生物分子通过光电生物传 感器检出。因此，作者认为可以将光电生物传感器利用于DNA 甲基化检测。光电生物传 感器中，光电材料的光电转化效率是传感器性能的重要影响因素。作者选用了Bi S 作为 2 3