1.2基因工程的基本操作程序学案(人教版选修3).doc
1.2基因工程的基本操作程序
1.获取目的基因的常用方法有:从基因文库中获取目的基因和利用PCR技术扩增目的基因。
2.基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。
3.一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因。
4.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
5.培育转基因动物时,受体细胞一般是受精卵,目的基因的导入方法常用显微注射技术。
6.检测目的基因是否导入和转录,常用分子杂交技术;检测是否翻译,常用抗原—抗体杂交技术。
目的基因的获取 [自读教材·夯基础]
1.目的基因
(1)主要是指编码蛋白质的基因。
(2)也可以是一些具有调控作用的因子。
2.获取方法
(1)从基因文库中获取:
基因文库的含义:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
(2)利用PCR技术扩增目的基因:
原理:DNA复制。
前提条件:有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。
条件:DNA模板、引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸。
扩增过程:
:模板DNA受热解旋为单链
↓
:冷却后,引物结合到互补DNA链上
↓
:在热稳定DNA聚合酶作用下,从引物起始进行互补链的合成
(3)
1.探讨基因文库、基因组文库、cDNA文
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